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【摘要】 目的:探讨EB病毒DNA(EB-DNA)检测对诊断患儿不明原因肺炎的临床意义。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测患儿呼吸道分泌物标本中的EB-DNA水平。结果:检测275例患儿咽拭子标本，阳性74例，阳性率26.9%。结论:EB-DNA检测对不明原因肺炎的诊断有一定的价值。 【关键词】 EB病毒;肺炎;荧光;聚合酶链反应
作者：刘金禄1 何晓峰2 李采青1 卢成1 作者单位：(1.河北北方学院附属第一医院微生物科，河北 张家口 075000;2.河北北方学院附属第一医院感染管理处，河北 张家口 075000)
目前，医学检验技术水平随着临床医学的迅猛发展也在不断提高，为了满足临床工作的需要，病毒检验方法已由传统的培养、血清学试验向分子生物学发展。EB病毒的检测已不局限于酶联免疫试验，已经将荧光定量PCR技术广泛应用于临床。现将我院近年来EB-DNA检测情况报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
为2008-10—2010-03月本院儿科门诊和住院275例不明原因肺炎患儿，其中男143例，女132例;年龄1~14岁，平均7.5岁;病程2~30d，均符合《实用儿科学》[1]的诊断标准。
1.2方法
1.2.1标本采集用咽拭子采集患儿的咽部分泌物，放入试管中备用。
1.2.2检测方法采用EB核酸扩增荧光定量检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司生产)对咽拭子标本进行核酸检测，按试剂盒说明书操作。仪器采用罗氏公司Light Cycle全自动荧光定量PCR仪。
1.2.3判定结果 大于50copy为阳性。
2结果
共检测275例呼吸道咽拭子标本，阳性74例，阳性率26.9%。
3讨论
EB病毒在人群中普遍感染，主要是引起传染性单核细胞增多症的病原体，但研究表明，该病原体引起呼吸道感染在逐年增多，一旦侵入人体，以持续感染或携带状态存在，并引起其他疾病或并发症。EBV-IgM酶联免疫检测方法由于检测方便，目前在许多医疗机构普遍采用。但由于方法的局限性常有假阳性发生。给临床确诊带来不便。
近年来PCR技术在国内的广泛开展，解决了EBV感染的诊断问题。我科在两年前就开展了此项工作，我们共检测275例呼吸道咽拭子标本，阳性74例，阳性率26.9%。比陈意振等[2](1997年)采用定性PCR方法阳性率14.52%和陈悦等[3](1996年)采用定性PCR方法阳性率10.8%都高。比黄体龙等[4]采用荧光定量PCR方法14.3%高。比周永忠等[5]采用荧光定量PCR方法46%低，结果差异可能与检测方法、所用检测标本种类、不同地区以及季节性有关。
近几年来特殊病毒及变异病毒引起呼吸道感染在增高，且病情特殊、发病严重，死亡率增高。婴幼儿肺炎也呈上升趋势。因此对病原体的早期诊断越发显得重要。病毒培养技术要求高，一般实验室难以开展。酶联方法假阳性高，也不近人意。只有荧光定量PCR检测方法敏感性高，特异性强，准确性可靠。因此，采用荧光定量PCR方法检测EBV-DNA对诊断及治疗，具有可靠的应用价值，值得在临床推广应用。
【参考文献】
1胡亚美,江载芳,诸福堂.实用儿科学\[M\].第7版.北京:人民卫生出版，2000.1204-1205.
2陈意振，鲁莉萍，邹波.应用PCR技术检测小儿呼吸道病原体的研究\[J\].中国优生与遗传，1997，5(6)：44-45.
3陈悦，佟彤.应用聚合酶链反应(PCR)技术对EB病毒体检测\[J\].中国优生与遗传，1996，4(3)：18-19.
4黄体龙，杨跃煌.PCR法检测140例儿童EB病毒DNA的临床分析\[J\].中国小儿血液与肿瘤杂志，2007，12(3):121-123.
5周永忠，杜记恩.荧光定量检测儿童EB病毒感染中的应用\[J\].分子诊断与治疗杂志，2009，1(5):241-242.
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