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摘要：目的 探讨不同抗凝剂、不同保存温度和保存时间对化学发光法检测降钙素原（ＰＣＴ）的影响。方法 采集１３例疑似细菌感染患者血液，分别置于干燥管和含有分离胶、肝素锂、乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ-Ｋ２）的采血管中，分离血清或血浆，采用ＲｏｃｈｅＣｏｂａｓｅ６０１电化学发光免疫分析仪分别在即刻、１２、２４和７２ｈ进行检测，根据检测结果选出最适采血管，再采集９例疑似细菌感染患者血液置于最适采血管中分离血清或血浆分别存放于４、－３０及－７０℃，在不同的时间进行检测。结果 １３例患者标本，不同采血管在分离血清或血浆后即刻检测结果差异不超过１５％，ＥＤＴＡ-Ｋ２抗凝标本室温存放１２、２４和７２ｈ均降解最少，分别为（２.６１±０.５６）％、（３.８６±０.７６）％、（１５.７７±１.６５）％。ＥＤＴＡ-Ｋ２抗凝标本存放于４、－３０及－７０℃，７ｄ后降解不明显。结论 不同抗凝剂对电化学发光法检测ＰＣＴ没有明显差异，为了标本的有效保存和缩短标本检测时间，推荐临床使用ＥＤＴＡ-Ｋ２抗凝的血浆进行电化学发光法ＰＣＴ的检测。
关键词：降钙素原；抗凝剂；保存时间；保存温度
降钙素原（ｐｒｏｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ，ＰＣＴ）是无激素活性的降钙素前肽物质，是由１１６个氨基酸组成的相对分子质量为１３０００的糖蛋白。在生理情况下，主要是由甲状腺滤泡细胞产生，其浓度通常＜０.１ｎｇ／ｍＬ。１９９３年，Ａｓｓｉｃｏｔ等首先提出ＰＣＴ可以作为细菌感染的标志物。严重感染患者的ＰＣＴ显著升高，并与感染的严重程度及临床预后密切相关。其在感染后２～４ｈ即可升高，８～２４ｈ就可以升高到峰值，并且其半衰期较长（２０～２４ｈ），近年来ＰＣＴ在提示细菌感染及其感染程度、判断治疗效果、指导抗菌药物治疗等方面发挥了重要的作用。作为临床实验室，对ＰＣＴ检测时选择何种抗凝剂、采血后多长时间进行检测仍然有效和如何有效的保存标本是我们关心的问题，我们对此进行了探讨。
材料和方法
一、材料
采血管采用ＢＤ公司的真空采血管。肝素锂管批号为１２１３６２２，抗凝剂为７５ＵＳＰＵｎｉｔｓ；乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ-Ｋ２）管批号为１１４６８９７，抗凝剂３.６ｍｇ；分离胶管批号为１１７９９４８；普通干燥管批号为１１６７５９７。ＲｏｃｈｅＣｏｂａｓｅ６０１电化学发光免疫分析仪及其配套试剂、校准品、质控品（试剂批号为１６２１９２；校准品批号为１６２１９２；质控品批号为低值１６１９５３００，高值１６１９５４００）和配套消耗品。
二、方法
１．ＲｏｃｈｅＣｏｂａｓｅ６０１电化学发光免疫分析仪检测ＰＣＴ的精密度验证 参考美国临床实验室标准化协会（ＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｔａｎｄａｒｄｓＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＬＳＩ）的ＥＰ１５-Ａ２文件《用户对精密度和准确度性能的核实试验２批准指南》，选用５个不同浓度的标本，每个标本每天重复测定４次，持续５ｄ。计算分析内不精密度为１.０４％，总不精密度为１.２１％。仪器完全满足临床检测需要。
２．血液标本的采集 疑似细菌感染的住院患者１３例，其中男７例，女６例，平均年龄４５岁。空腹抽取静脉血分别注入真空干燥管、分离胶管、肝素锂管和ＥＤＴＡ-Ｋ２管中。普通干燥管和分离胶管室温（２０～２５℃）放置３０ｍｉｎ，待血液凝固后１３００×ｇ离心１０ｍｉｎ分离血清，肝素锂管和ＥＤＴＡ-Ｋ２管颠倒混匀后即刻１３００×ｇ离心１０ｍｉｎ分离血浆。分离的血清或血浆各分装若干份于ＥＰ管密封备用。
３．分析方法 （１）不同抗凝剂对ＰＣＴ检测结果的影响分析：用ＲｏｃｈｅＣｏｂａｓｅ６０１电化学发光免疫分析仪对１３例分装于真空干燥管、分离胶管、肝素锂管和ＥＤＴＡ-Ｋ２管分离的患者血清或血浆分别在即刻、１２、２４和７２ｈ进行测定；（２）不同保存温度和保存时间对ＰＣＴ检测结果的影响分析：用前一步选出的最适采血管，采集９例疑似细菌感染的住院患者（其中男４例，女５例，平均年龄４１岁）血清或血浆，分别置于４、－３０和－７０℃保存，即刻分离血清或血浆时测定１次，４℃保存的标本分别在１２ｈ、２４ｈ、７２ｈ、７ｄ进行测定，－３０和－７０℃保存的标本分别在２４ｈ、７２ｈ、７ｄ进行测定（－７０℃保存的标本在７ｄ进行检测之前反复冻融２次）。
三、统计学方法
采用ＳＰＳＳ１７.０软件进行统计学分析，检测结果以±ｓ或平均浓度百分率±百分标准差表示，采用配对资料的ｔ检验，Ｐ＜０.０５为差异有统计学意义。 |