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ELISA与化学发光法测尿微量白蛋白临床评价

时间:2010-04-23 19:51来源:收集整理 点击:

  尿微量白蛋白(MAU)是指尿中白蛋白含量超出健康人参考范围,但不能用常规的方法检测出这种微量的变化。为了使这一检测指标标准化,国际上采用白蛋白分泌率表示尿中白蛋白的排出量。健康人MAU在<20~30mg/24h(或<20~30μg/min)的范围内;MAU在20~300μg/24h时称其为MAU;MAU>300mg/24h时称其为大量白蛋白尿。MAU排出量增加是疾病早期的改变,对疾病的早期诊断,早期治疗有重要的参考价值和临床意义[1]。大量的临床研究表明MAU是预测糖尿病、高血压、心血管疾病血管损伤的敏感指标。目前国际上十分重视MAU的测定,认为这项指标对早期治疗原发病、分析病程进展、评价相关危险因素具有重要意义[2]。本文分别用ELISA法和化学发光法测定尿微量白蛋白浓度,对其结果进行比较,并比较其优缺点,从而评价ELISA法的临床适用性。

  1  材料与方法

  1.1  对象 为2007年1~3月份来我院就诊的115位患者,年龄在32~73岁之间平均(50.8±7.1)岁。都是临床初步诊断疑为肾病、糖尿病、风湿病及心血管病等等不同类型的患者。

  1.2  标本采集及处理  取每位患者的晨尿4~5ml于冰箱4~8℃保存,收集至115份标本之后,1周之内同时采用2种方法测定。

  1.3  试剂与仪器 美国DPC公司生产的IMMULITE型全自动化学发光分析仪;ELX—800酶标仪(美国BIO-TEK);洗板机(BIO-RAD,MODEL1575)。

  化学发光法试剂为:美国DPC公司生产的YZB/USA 2153-40《白蛋白试剂盒》; ELISA法 :北京科卫临床诊断试剂有限公司生产的《尿微量白蛋白定量检测试剂盒》。

  1.4  方法

  1.4.1  化学发光法:严格按照美国DPC公司生产的《白蛋白试剂盒》操作手册进行。

  1.4.2  ELISA 法:严格按照北京科卫临床诊断试剂有限公司生产的《尿微量白蛋白定量检测试剂盒》的操作手册进行。

  1.4.3  测定分析:用上述两种方法对上述115份患者尿标本微量白蛋白浓度进行测量,分别在ELX—800酶标仪上和全自动化学发光分析仪上直接读取结果。

  1.5  统计学检验:采用SPSS10.0统计软件,检测数据表示用x±s,组间数据比较用t检验,变量间的变化采用相关性分析。

  2  结果
    
  为了评价ELISA法测定尿微量白蛋白的准确性,我们采用双盲的方法与化学发光法进行比较.收集115例病人尿样分别使用ELISA方法和化学发光法进行测定, 化学发光法测定的平均值为10.39 mg/L,ELISA法测定的平均值为10.56mg/L,统计学线性回归分析显示相关系数r值为0.994。二者有较好的相关性.且P>0.05,即可以认为用ELISA测定的尿微量蛋白结果与化学发光测定结果没有明显差异。

  3  讨论
    
  白蛋白是血浆白蛋白,由肝脏产生[3],分子量为66KD,半径约为3.6nm,在血浆环境中带负电荷,不易通过肾小球基底膜的孔径屏障和电荷屏障,而原尿中的白蛋白在肾小管几乎全部被重吸收,所以每日排出量仅10~30mg,常规干化学定量测定尿蛋白为阴性,故临床习惯称正常尿中无蛋白[4]。当肾脏发生早期损害时,由于肾小球毛细管渗透性和血管壁成分的改变,白蛋白可通过肾小球基底膜渗透到尿液中,尿中白蛋白排泄明显高于正常,其浓度通常在20~200mg/L之间,于是形成了微量白蛋白尿[5]。通常用常规方法难以检出,而当病变发展到尿常规蛋白测定结果为阳性时,肾脏的损伤往往已达到不可恢复的阶段[6]。近年来许多研究表明尿微量白蛋白不仅是糖尿病肾病的预测指标,也是心血管疾病的独立危险因素[7],所以检测尿微量白蛋白有重要的临床价值。本文分别用ELISA法和化学发光法测定尿微量白蛋白浓度,对其结果进行比较,并比较其优缺点,从而评价ELISA法的临床适用性。

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