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　　1.2 方 法

　　HBV血清标志物检测采用ELISA法,试剂盒由北京万泰生物药业股份有限公司提供;HBVLP定性检测采用ELISA法,采用针对构象型前S区的单克隆抗体,试剂盒由北京热景生物技术公司提供,Cutoff值为0.105;HBVDNA定量检测采用实时荧光定量PCR 方法,试剂盒由上海克隆生物高技术有限公司提供,检测下限为1.0×103copies/ml。以上均严格按试剂说明书操作。

　　1.3 统计学处理

　　采用SPSS 13.0 软件进行统计学分析。计量资料用x±s表示, 计数资料用率表示。HBVLP 和HBVDNA间的阳性率的比较采用χ2 检验, HBVLP含量与HBVDNA拷贝数之间相关性采用线性相关分析。

　　2 结 果

　　2.1 HBVLP与HBVDNA的阳性率比较

　　405例乙型肝炎患者血清中, HBVLP的阳性率为75.06%, HBVDNA的阳性率为70.12%, 两者间差异无统计学意义(χ2=2.48，P>0.05)。HBVLP和HBVDNA检出的一致率为71.85%。结果见表1。表1 405例乙型肝炎患者中HBVLP与HBVDNA检测结果

　　2.2 血清HBVLP与HBVDNA水平之间的比较

　　以HBVLP的光密度(D值)与HBVDNA拷贝数的对数值作相关分析，405例乙型肝炎患者血清中，随着HBVDNA拷贝数的增加其血清HBVLP含量呈上升趋势，其相关系数r=0.944,P<0.05。表明HBVLP的含量与HBVDNA拷贝数之间具有正相关性。见表2。表2 HBVLP(D值)与HBVDNA拷贝数之间的关系

　　2.3 HBeAg不同模式中HBVLP与HBVDNA的阳性检出率

　　检测158例HBeAg阳性血清标本，HBVLP阳性检出率是93.67%(148/158)，HBVDNA的阳性检出率是88.61%(140/158),两者无显著性差异(χ2=2.51,P>0.05);检测247例HBeAg阴性血清标本，HBVLP阳性检出率是63.16%(156/247)，HBVDNA的阳性检出率是58.30%(144/247),两者无显著性差异(χ2=1.22,P>0.05)。

　　2.4 HBVDNA阳性血清中HBVLP与HBeAg阳性率比较

　　在284例HBVDNA阳性血清中, HBVLP的阳性率是83.45%(237/284), HBeAg的阳性率是49.30%(140/284), HBVLP的阳性率明显高于HBeAg的阳性率,两者差异有显著性统计学意义(χ2=74.22,P<0.01)。

　　3 讨 论

　　虽然HBVDNA定量检测已成为判断HBV复制最直接可靠的指标，但对于抗病毒治疗的患者来说，HBVDNA阴性并不意味着已经清除了病毒。因为肝内cccDNA的降低远远低于血清HBVDNA水平，血清HBVDNA不能真实反映肝组织内HBV复制情况[4]。许多基层医疗机构不能进行核酸检测，仅依靠HBeAg血清转换和肝功能作为判断HBV复制的指标。在部分HBeAg阴性慢性乙肝患者中，由于HBV基因前C区或CP区的变异，导致HBeAg合成障碍，HBeAg呈阴性但HBV仍存在复制现象[5]。HBeAg阴性慢性乙肝患者占乙肝患者的比例在增加，我国慢性HBV感染患者，尤其是肝硬化患者HBeAg阴性者高达60%以上[6]，因此探索新的测定简单、成本低廉的判定HBV复制的血清学指标成为目前的研究热点之一。

　　Bruns等[7] 通过研究鸭乙肝病毒发现，含有嗜肝病毒血清的感染性不仅依赖于具感染性的病毒颗粒(Dane氏颗粒)的多少，而且还依赖于缺乏核酸的亚病毒颗粒的数量。HBVLP是HBV Dane氏颗粒和亚病毒颗粒的主要包膜成分，与HBV病毒的复制程度密切相关，在感染早期它与细胞受体结合介导病毒的内摄入，在感染晚期是病毒组装和分泌的关键。尤其是亚病毒颗粒在HBV感染过程中还能显著增强细胞内HBV的复制和基因表达，这是由于HBVLP前S区的反式激活作用所触发的。Foo等[8]证明HBVLP是导致肝细胞损伤、死亡和纤维化病变的主要原因。因此检测HBVLP对反映病毒复制情况和预后具有重要的临床意义。

　　本文研究显示405例乙肝患者中HBVLP阳性率和HBVDNA阳性率无统计学差异，两者检出一致率为71.85%，且HBVLP含量与HBVDNA的拷贝数呈正相关。HBeAg阳性和HBeAg阴性患者的HBVLP和HBVDNA阳性率差异均无统计学意义。在284例HBVDNA阳性的患者中，HBeAg阳性率仅49.30%，而HBVLP阳性率达到83.45%。这表明HBVLP对于判定乙肝患者体内病毒复制水平优于HBeAg，与HBVDNA具有相似的临床价值。在我们检测121例HBVDNA阴性的患者血清中，尚有67例HBVLP阳性，但其含量均较低。我们发现这些血清均来自处于抗病毒治疗过程中的患者，可能的原因是：① 由于抗病毒药物的应用，HBV具有的适应性和变异性导致HBV基因变异，已经设计好的商品化PCR探针引物不能与之匹配而造成漏检;② 目前的抗病毒药物只能抑制HBVDNA的复制，并不能抑制已形成的病毒表达蛋白。这一现象提示我们在HBVDNA阴性的患者中，HBVLP阳性可能是肝内病毒继续复制和抗病毒治疗不彻底的标志，但对于这一结论还需进一步研究。