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众多流行病学研究证实，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)呈负相关。美国Framingham的研究显示，HDL-C每减少0.026 mmol/L(1 mg/dl)，冠心病(CHD)发生的风险将增加2%～3%。目前临床上已广泛采用HDL-C下降作为CHD危险因素指标。低HDL-C［?.91 mmol/L (35 mg/dl)］是CHD的主要危险因素，而高HDL-C［≥1.55 mmol/L(60 mg/dl)］被认为是负危险因子，具有保护性［1，2］。作者参考美国国家胆固醇教育计划(NCEP)有关文件及新近文献资料，对HDL-C检测方法及标准化问题作一简述。 一、HDL的生物化学 与乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)相比，高密度脂蛋白(HDL)是密度最大的脂蛋白(d=1.063～1.210 kg/L)。其组分中蛋白质(Pro)、磷脂(PL)、胆固醇(chol)和甘油三酯(TG)各约占50%、25%、20%和5%。HDL中Pro主要是载脂蛋白(apo)AI和AII；chol占总胆固醇(TC)的25%～35%，酯化胆固醇(CE)和游离胆固醇(FC)之比约为3∶1。HDL可通过酶和受体的作用，将周围组织的chol移至肝脏降解处理，同时抑制细胞结合和摄取LDL-C，阻止chol在动脉壁的沉积，故HDL被认为是AS的预防因子［3］。 二、HDL-C检测方法 由于所有脂蛋白都含有chol，因此必须从其他脂蛋白中分离出HDL后再行测定。分离HDL的方法有超速离心法、凝胶过滤法、免疫化学法、电泳法及化学沉淀法。临床化学实验室应用最广泛的是化学沉淀法。近来国外连续报道了几种HDL-C的直接测定方法，因其简便、快速，能进行自动化分析，已引起广泛关注。 1.参考方法：美国疾病控制与预防中心(CDC)测定HDL-C的参考方法为超速离心法，也为NCEP所推荐［4］。该法分三步进行：(1)超速离心(40000r/min，18.5小时)除去密度(d)＜1.006 kg/L富含TG的脂蛋白(CM、VLDL)。(2)下层悬浮液用肝素-MnCl2法(Hep-Mn2+法)离心沉淀(1 500×g，30分钟)，以除去富含apoB的脂蛋白［LDL、Lp(a)］。(3)测定上清液中chol含量，方法用CDC参考方法(ALBK法)。此法主要用于靶值的确定及各种HDL-C检测方法学评价，也是国际间人群调查研究准确性基础。由于需超速离心机，操作复杂且严格，所需标本量大(5 ml血浆)，离心时间长，一般实验室难以开展，不适于大规模标本比较研究。CDC胆固醇参考方法实验室网络(Cholesterol reference Method LaboratoryNetwork, CRMLN)近来选用了一种“指定性比较方法”作为转移CDC参考方法准确性的适用方法。此法首先用硫酸葡聚糖(DS50，分子量5万)作沉淀剂(DS50-Mg2+)，离心沉淀，除去含apoB的脂蛋白［CM、VLDL、IDL、LDL和Lp(a)］；然后上清液HDL中胆固醇采用ALBK法测定。这种方法已在网络的每个实验室被仔细评价及成功地进行标准化，相对CDC参考方法而言，已大为简化［5］。发展与CDC参考方法结果具有可比性的改良简单化参考方法将会促进HDL-C标准化在常规实验室中的开展。 2.化学沉淀法：常用的沉淀剂为多阴离子，如磷钨酸(PTA)、DS、肝素(Hep)或非离子多聚体如聚乙二醇(PEG)与某些两价阳离子(如Mg2+、Ca2+、Mn2+)合用能使除HDL外含apoB的脂蛋白都沉淀。沉淀形成的机制还不十分清楚。HDL中chol多用酶法(CHOD-PAP)测定。此类方法操作简单，不需昂贵设备且费用较低，适用于普通实验室。被NCEP推荐为常规方法［5］。 早期的沉淀法如用Hep-Mn2+法，易受高TG干扰，使沉淀后的上清呈浑浊状，且Mn2+干扰酶法测定chol，故目前已基本不用。只是CDC-NHLBI(国立心肺血液学研究所)现存的有关HDL-C与CHD风险的流行病与临床数据库源于此法，故NCEP建议予以保留。PEG6000-Mg |