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3 RxL-HM检测法 RxL-HM检测法是以两个特异性的单克隆抗体为基础的一步酶免疫检测法，检测时间为17min，灵敏度为0.1µg/L，方法简便。ELISA快速定量检测cTnI所需时间为10min，灵敏度为0.01µg/L，诊断AMI的阈值为0.15µg/L，初始敏感度为63%。延长至4H后敏感度提高至98%，比Stratus检测法（初始和4h后敏感度分别为48%和85%）更敏感，且能提供更好的预后信息。 4 CTnI检测方法影响因素 应当注意的是，虽然cTnI的检测方法很多，但因其定量测定受到许多因素的影响，各种检测方法有着不同的临界值，各种检测结果之间最大可相差达36倍。其原因有以下几个：（1）无论是在患者的血流中，还是在全血或血清标本中，cTnI均会有不同程度的降解，游离和复合物形式的cTnI及其降解片段结构各异，各种检测方法使用针对不同抗原决定簇的cTnI抗体，其免疫反应必然各不相同。已用研究发现，虽然cTnI的N末端和C末端的抗原性很强，但无论是在血清还是在坏死的心肌组织中，都极易被蛋白酶快速水解，而中央区（30-100氨基酸序列）却有较高的稳定性，故建议选择能够优先识别这些比较稳定的氨基酸序列的抗体，被认为有助于cTnI免疫检测的标准化以及有利于提高特异性和敏感性；（2）由于多数单克隆抗体不能与cTnI-cTnC复合物结合，为了达到快速检测相应抗原的目的，常使用EDTA(Ca+螯合剂)等抗凝剂，解离cTnI-cTnC复合物，促使单抗与cTnI结合，但若这些抗凝剂应用不当也会影响检测结果；（3）溶血或高胆红素血症以及风湿等因素对cTnI测定也有一定的影响，有的可能会产生假阳性结果；（4）缺少统一的校正标准品。最近在欧洲心脏病学会（ESC）和美国心脏病学院（ACC）组织的会议上，生物化学小组专家已提出应尽快通过检测cTnI标准化来解决上述问题。 CTnI检测的临床意义 1 急性冠脉综合征的临床诊断、预后估计和危险分层 ACS是动脉粥样硬化斑块脱落、血小板聚集、血栓形成、心肌缺血和心肌坏死等临床病理生理改变引起的一系列临床症状，它包括了不稳定性心绞痛和AMI等各种因冠脉狭窄、阻塞引起心肌缺血以至梗死的综合症状。 目前，公认的早期心肌损伤的生化标志物主要限于肌红蛋白（myoglobin, Mb）和CK-MB， WHO对AMI诊断标准已有了许多修改。由于CK-MB、CK和Mb不仅存在于心肌组织中，也存在于非心肌组织中。在骨骼肌受损伤时，它们可不同程度的升高。另外，CK-MB在血中存在的时间较短（1-4天）。CTn浓度的敏感性和特异性高于CK-MB、CK和Mb等酶标志物，患者发病后cTn出现较早，持续时间长，是目前诊断心肌损伤较好的确定标志物。此外作为Tn之一的cTnT在慢性肾衰、横纹肌溶解、肺炎、败血症患者也呈不同程度的增高。而且cTnT分子量大于cTnI。故意在AMI发生后，cTnT释放入血时间比cTnI延迟，而cTnI却有其独特的心肌特异性和诊断窗口期较长的优势。 在AMI初期，cTnI的敏感性略逊于Mb、CK-MB；在AMI出现症状后4h，cTnI、Mb和CK-MB的敏感性分别为96.9%、100%和92.3%；但此时cTnI的特异性和ROC效率最高，分别为100%和95.6%，而Mb为46%和56%，CK-CB为78%和81%；当出现症状后10-70h，cTnI的敏感性、特异性和ROC均为100%。国外有学者已指出，一定要在AMI出现症状后6-9h，采血检验cTnI，这一点至关重要。Mb和CK-MB的最大敏感度则分别在AMI出现的2-8h和7-24h；在70h，二者的敏感度下降了，分别为20%和37%。所以，无论在AMI早期，还是晚期，cTnI都是一个敏感性和特异性较高的指标。基于cTnI以上特点，国外对怀疑AMI的患者，早期做cTnI、Mb和CK-MB三项血清学检查。Mb作为过筛试验，cTnI阳性和CK-MB阴性者为高危患者；cTnI和CK-MB均阴性，临床症状可疑者，需做3h、6h、9h和12h血cTnI动态观察，而cTnI其诊断窗口期最长，可达7-9天。 |