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白色念珠菌的实验室分离及注意事项

时间:2013-10-19 20:01来源:幸福检验网 收集整理 点击:
白色念珠菌即假丝酵母菌是假丝酵母菌病的病原菌。假丝酵母菌病在世界各地均有报告,发生于一切年龄、一切种族的男女中。因病原菌感染部位不同,可引起皮肤、黏膜、支气管或肺发生病变,有时甚至引起败血症、心内膜炎、脑膜炎或其它内脏的炎症。假丝酵母菌属包括白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、伪热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、副克柔假丝酵母菌、类星型假丝酵母菌和季利蒙假丝酵母菌。假丝酵母菌病主要是由白假丝酵母菌引起。假丝酵母菌为芽生,有假菌丝,可产生厚膜孢子,但不产生子囊。
 
【分离方法】
 
取刮屑、拭子或痰、脓等临床标本接种于加有青、链霉素的沙保葡萄糖琼脂平板上,置37℃和室温培养。经2天~4天,可见乳酪样、中等大小、湿润呈暗淡无光的菌落长出,有明显的酵母样气味。
 
【鉴定方法】
 
1.   直接检查:一般用于浅部假丝酵母菌病,取口腔病灶黏膜、阴道分泌物、皮屑、甲屑,也可作血、尿、粪、脑脊液、胸水、活组织或尸体解剖材料。制作KOH溶液或盐水盖玻片标本,显微镜观察有无圆形或卵圆形的芽生孢子,有的亦可发现假菌丝或厚膜孢子。若查到大量假菌丝表明假丝酵母菌处于致病阶段,对确诊有一定意义.。革兰染色阳性,着色不均匀。
 
2.   培养检查
 
⑴ 在沙保葡萄糖琼脂培养基上,于室温及37℃培养均能生长, 逐日查看菌落生长情况。菌落为酵母样菌落,呈奶油色,柔软而光滑,陈旧培养物则颜色变深并逐渐变硬或有皱褶。镜检见有假菌丝及成群2~4μm×6μm大小的孢子(见图29-1A)。
 
⑵ 在血液琼脂培养基上,则需10天左右才能形成中等大的暗色菌落。
 
⑶ 在玉米琼脂或米粉吐温琼脂培养基,于室温培养,经25~28℃孵育24~48小时后生长出灰白色菌落,可查见有厚膜孢子形成。假丝酵母菌中仅白假丝酵母菌产生厚膜孢子,这是鉴定白假丝酵母菌的重要特征。
 
⑷ 接种于0.2~0.5 mL人或动物血清中,37℃孵育3小时(不超过4小时),取一接种环血清在显微镜下观察是否形成芽管。
 
⑸ 在含0.005%氯化三苯基四氮唑的葡萄糖蛋白胨琼脂上,接种物如为白假丝酵母菌,培养基不变色或仅呈淡红色,而其它假丝酵母菌变为红色。
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