3. 厚膜孢子形成实验
材料:玉米-吐温80琼脂(配方及配制方法见附录)及待检菌
方法:
(1) 将培养基加热溶化,取适量置于洁净的载玻片上,待凝固。
(2) 将待检菌按水平方向穿刺接种于培养基内。
(3) 将接种物置潮湿平皿内,室温孵育24~72小时。
(4) 将载玻片置显微镜下观察。
(5) 观察结果。
4. 芽管形成实验
材料:无菌人血清及待检菌。
方法:在载玻片上加1滴无菌人血清,接种少量待检菌,盖上盖玻片,将其置潮湿平皿内,35℃培养箱孵育,每隔1小时取出观察芽管形成情况。
5. 动物接种:在假丝酵母菌属中,只有白假丝酵母菌对实验动物有致病性。静脉接种1mL白假丝酵母菌1%盐水混悬液于家兔,4天~5天内家兔可死亡,解剖可见肾脏肿大,有许多白色小脓肿分布在肾皮质上。注射于家兔皮内,于48小时可形成脓肿。白假丝酵母菌盐水悬液静脉注射或悬于5%猪胃粘液素中腹腔接种,对小白鼠有致病性。
6. 血清学检查:
(1) 假丝酵母菌凝集实验:以杀死的白假丝酵母菌作抗原实验。有60%~75%病例其双份血清滴度有4倍增长,正常人亦有低效价凝集素存在。
(2) 假丝酵母菌沉淀实验:用对流免疫电泳或免疫扩散法,用白假丝酵母菌细胞壁甘露聚糖或酵母细胞胞质抗原进行实验,敏感性和特异性均好。
【判定标准】
1. 依据在玉米琼脂上的生长物检出假菌丝和厚膜孢子,可定为白假丝酵母菌。
2. TTC沙保琼脂上生长,培养基不变色或仅呈淡红色,可定为白假丝酵母菌。
3. 在血中或脊髓液中查到假丝酵母菌可以确诊。
4. 假丝酵母菌沉淀实验可诊断全身性假丝酵母菌病。
【注意事项】
1. 从痰中分离出白假丝酵母菌不能作为假丝酵母菌病的唯一根据,应结合临床作出判定。
可根据对葡萄糖、乳糖、麦芽糖、庶糖等发酵实验和培养特征对假丝酵母菌属的菌种作出鉴别。
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