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甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立(3)

时间:2011-11-04 20:21来源:幸福检验 整理 点击:
3讨论
  甲胎蛋白(AFP)为最常用的肿瘤标志物之一,其定量检测的方法主要有放射免疫法、酶联免疫法、时间分辨荧光免疫法和化学发光免疫法,各具特点. 
    
  本研究建立的甲胎蛋白(AFP)化学发光免疫定量分析方法[6],采用自行设计AFP多抗血清制备和纯化工艺,采用改良过碘酸钠乙二醇法对AFP多抗进行ALP标记,较传统的戊二醛交联法标记效率要高,灵敏度、特异性都较好;采用金刚烷衍生物及其增强剂作为发光底物系统[7], 其酶解速度快,达到最大光信号时间短,且发光信号强、持续时间长,信噪比高,通过优化增强剂的浓度能使发光强度增强100~100 000倍;可测定浓度线性范围宽,样品无需稀释即可检测. 由于化学发光具有荧光的特异性,同时不需要激发光,从而避免了荧光分析中激发光杂散光的影响,有很高的灵敏度,该方法最低检出量为2.0 ng/mL. 该方法克服了传统的放射免疫法带来的环境污染和健康危害;操作简单,检测自动化程度高,适用于全自动和半自动仪器
  本研究建立的方法敏感性、特异性、线性范围、精密度、回收率均能满足常规临床检测要求,其采用的是开放式反应系统,因此可与大多数的化学发光检测仪器配套使用,在临床推广应用.
【参考文献】略
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