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(一)血清学试验
1.补体结合试验
补体结合试验(CF)是40年代发展起来的一项沙眼衣原体血清学试验,最初所用的抗原是从鸡胚卵黄囊中培养的沙眼衣原体提取出来的, 主要是一种属特异性抗原(脂多糖)。它可以用来检测病人血清中所产生的衣原体抗体。 由于性病性淋病肉芽肿(LGV)病程极为缓慢,因此可以用单份血清来作诊断。如果补体结合试验滴度≥1:256则有力支持LGV的诊断; ≤1:32则可排除LGV。一般来说,滴度≥1:64即符合LGV,但此值的敏感性和特异性如何尚不十分清楚。在常见的沙眼衣原体性尿道炎中CF滴度很少高于1:16。补体结合试验的操作繁琐,技术要求高,又难以有高质量的抗原供应。尽管目前仍有人推荐用于LGV的诊断,但大多数实验室趋于采用更为方便、且有商品化试剂盒供应的方法。
2. 微量免疫荧光法
微量免疫荧光法(micro-immunofluorescence, MIF)是在70年代建立的,主要用于血清流行病学的研究。MIF采用从细胞培养中提取出的经福尔马林固定的沙眼衣原体抗原。主要用于测定沙眼衣原体型特异性抗体。抗衣原体IgG抗体的存在表明有衣原体既往感染。而高滴度的IgM抗体说明为衣原体的首次感染。据报导, MIF对婴儿衣原体肺炎有诊断价值。LGV中MIF的滴度很高,且比CF更为特异。其缺点是非常费时费力,仅限于少数研究实验室使用。但是,现在已有改进了的单一抗原的免疫荧光试验,方便了实验操作。这种试验只采用一种血清型的沙眼衣原体抗原(L1或L2),检测对全部血清型沙眼衣原体有广泛交叉反应的抗体,既可检测IgG,又可检测IgM。
正常人群的衣原体抗体本底检出率约20%～30%,但在性关系混乱的人群中抗体检出率达80%。一般来说,无并发症的衣原体抗体滴度低,不适于应用血清试验。而在深部感染或系统感染病人,抗体滴度可达1:640或更高。LGV、新生儿肺炎或盆腔炎性疾病患者测得高滴度抗体具有诊断意义。
3. 酶免疫法
利用酶免疫法检测针对沙眼衣原体属特异性抗原的血清抗体,已有不少试剂盒供应。这些试验敏感性很高,但与肺炎衣原体亦有某种程度的交叉反应。有鉴于此, 该法用于筛查低危或中等危险的人群可能更有用处。
(二)沙眼衣原体细胞培养
用来培养LGV株的临床标本,在男性常采自尿道、直肠和腹股沟横痃抽吸液,女性常采自直肠或宫颈。拭子采集标本后放入运送液中,在18小时内送至中心实验室,或放入-70℃中,保存备用。对直肠标本进行衣原体培养分离时，因标本中含有大量的杂菌,应先以抗生素作预处理。LGV株不需离心即可感染细胞,利用这种特性可以作初步的鉴定。尽管培养可以明确LGV感染,但它的敏感性并不太高,即使有明显症状者也是如此。加上培养技术要求高,血清学分型不易,因此,诊断LGV常用的方法仍然是血清学方法。
(三)其它方法
用于检测沙眼衣原体抗原的直接免疫荧光法和酶联免疫吸试验已有商品化试剂供应,如Microtrak和Chlamydiazyme等。它们可以用来诊断LGV感染,不失为一种快速简便而又较为准确的检查手段。还可应用聚合酶链反应(PCR)检测临床标本中的衣原体DNA。Frei皮肤试验目前已很少使用。
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