体液检验 生化检验免疫检验 微生物类 血液检验 输血管理
返回首页

血红蛋白电泳检查(电泳法)(2)

时间:2010-10-17 08:03来源:幸福检验 xf366.com 点击:
9.7 降低支架,使缓冲条不接触到凝胶板。
9.8 从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放在4号位置。
9.9 关上电泳仪盖子,按下键盘左侧的绿色箭头“START”键,电泳开始。
9.10 凝胶染色扫描
9.10.1 打开盖子
9.10.2 取出并丢弃加样器
9.10.3 升高两个支架,握住塑料端取出并丢弃缓冲条。
9.10.4 打开凝胶托架,平放,将干燥的凝胶片放入两层间,然后关上托架。
9.10.5 将凝胶支架放入染色池
9.10.6 取出凝胶支架,打开盖子,取出干燥的凝胶片。
9.10.7 在光密度仪的570nm处或以黄色滤光片扫描测定。使用HYDRYS,DVSE或PREFERENCE光密度仪时,使A2片段的标记置于扫描板5mm的标志处。
 
10. 结果判断与参考范围
扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后,首先清洁胶片的背面。判断溶血液的浓度是否合适,主要看基质带的浓度,如基质带浓度过淡,说明溶血液的浓度太淡。正常时A2浓度大约为基质带浓度的1-2倍。
半岁-成人:HbA≧94.5﹪,HbF﹤2.0%,HbA2﹤3.5%
1个月:HbA 12-40﹪,HbF 60-93%,HbA2 0.1-1.0%
6个月:HbA 86-98﹪,HbF 0.84-10.7%,HbA2 0.87-2.9%
脐带血:HbA 4-40﹪,HbF 30-96%,HbA2﹤1.0%
 
建议测定每一批样本时都附有一控制品或含有血红蛋白A,F,C和S的血样本。
 
12. 临床意义
12.1 检测β-地中海贫血
12.1.1 轻型:HbA2轻度升高,大多在4%-8%
12.1.2 中间型:HbA1A2缺如,HbF可达10%
12.1.3 重型:HbF:30%-90%,HbA多低于40%或甚至0%
12.2 检测α-地中海贫血
12.2.1 标准型α-地中海贫血:新生儿期HbBart′s可达5%-15%,几个月后消失。经煌焦油蓝温育后,少数红细胞内有H包涵体。血红蛋白电泳无异常发现。
12.2.2 血红蛋白H病:HbH在PH8.6或8.8电泳时,向阳极方向移动,泳速快于HbA;在PH6.5电泳时,仍向阳极方向移动。
12.2.3 血红蛋白Bart胎儿水肿综合症:Hb Bart′s占80%-100%,可有少量HbH。HbA、A2及F均缺如。
12.3 检测血红蛋白病:引起临床注意的异常血红蛋白有四种:S,C,E和D。
12.3.1 血红蛋白S:在碱性缓冲条件下血红蛋白S的条带位于A和A2片段之间
12.3.2 血红蛋白C:在碱性缓冲条件下血红蛋白C,E和A2的条带重叠在一起。若这一片段﹥15%,应怀疑有血红蛋白C或E的异常。
12.3.3 血红蛋白E:与血红蛋白C不同的是,E在酸性凝胶电泳中不与A2分离。
12.3.4 血红蛋白D:在碱性缓冲条件下,血红蛋白D和S的条带重叠在一起,但D在酸性凝胶电泳中不与A2分离。
 
13. 操作性能:灵敏度高、特异性强、操作简便,重复性好。
 
14. 注意事项:
14.1 试剂贮存于室温(15~30℃)或冰箱(2~8℃)内,不能冷冻。
14.2 不要应用溶血标本
14.3 若检测到异常血红蛋白,而又与常见的异常血红蛋白S,C,D或E不同,可使用其他方法(如球蛋白链电泳)检测,或求助于有关专门实验室
14.4 HbF小于全部血红蛋白的2%-3%时,扫描检测HbF(或其它一些较少见的血红蛋白)只是半定量的,结果不十分准确。
------分隔线----------------------------
赞助商链接
推荐内容
赞助商链接
赞助商链接