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G6PD 6-磷酸葡萄糖+NADP+ 6-磷酸葡萄糖酸盐+NADPH+H+ 可在340nm波长下测定NADPH生成速率而计算CK活性。 临床常规测定CK同工酶多用电泳和免疫抑制法，但位置两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定CK-MBmass，可不受溶血和巨CK的干扰。 （三）临床意义 CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。AMI时总CK活性升高显著，约在梗死后3～8h即升高，10～24h达峰值，3d～4d恢复正常。 CK-MM亚型测定对早期AMI的检出更为敏感，一般以CK-MM3/CK-MM1＞1.0作为诊断AMI的标准，但必须排除急性骨骼肌损伤。 四、乳酸脱氢酶及其同工酶 （一）生物化学特征 乳酸脱氢酶（LD或LDH）催化乳酸氧化成丙酮酸，同时将氢转移给辅酶而成为 NADH，依条件不同而有可逆性。反应式如下： pH8.8～9.8 L-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+ pH7.4～7.8 （二）体内分布 LD是一种含锌的糖酵解酶，广泛存在于人体各组织中，以肝、心肌、肾、肌肉、红细胞含量较多。LD是由两种不同亚基（M和H）组成的四聚体，形成5种结构不同的同工酶，即LD1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3）和LD5（M4）。 （三）测定方法 目前根据LD催化反应方向的不同，有两大类测LD方法，一大类为以丙酮酸为底物（反应方向P®L）的逆向反应（称LD-P法）；另一大类以乳酸为底物（反应方向L®P）的顺向反应（称LD-L法）。 临床上测定LD及其同工酶常用于诊断和鉴别诊断心、肝和骨骼肌的疾病。 LD同工酶测定常用电泳法、免疫沉淀法和免疫抑制法等。目前以琼脂糖凝胶电泳法更多用。一般成年人存在如下规律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5，部分正常儿童血中可见LD1＞LD2。 （三）临床意义 临床上测定LD同工酶有助于相应组织病变的诊断。心肌梗死和心肌炎时以LD1和LD2升高为主，且绝大多数的AMI患者血中LD同工酶都出现LD1/ LD2＞1，即所谓“反转比率”（flipped LD ratio）现象，且持续的时间长。骨骼肌和肝细胞损伤时常出现LD5＞LD4。急性肝炎时LD1和LD2相对下降，LD5升高；慢性肝炎时LD5升高，且LD1<LD3；肝硬化时仅表现LD2下降和LD5升高；肝癌时LD5升高，但LD1＞LD3。当心梗并发充血性心力衰竭、心原性休克时，LD5也可升高。肺、胰、脾、淋巴结坏死和炎症及各种恶性疾病时LD2、LD3、LD4升高；溶血性疾病、镰形细胞性贫血、地中海贫血、体外循环术后引起溶血、阵发性睡眠性血红蛋白尿时均有LD1和LD2升高，但仍为LD2＞LD1；恶性肿瘤如转移到肝脏往往伴有LD4、LD5升高。 五、碱性磷酸酶及其同工酶 （一）生物化学特征 碱性磷酸酶（ALP）是一种含锌的糖蛋白，在碱性环境中（最适pH为10左右）可以水解各种天然及人工合成的磷酸单酯化合物底物。ALP广泛存在于各器官组织中，其含量以肝脏为最多，其次为肾脏、胎盘、小肠、骨骼等。血清中ALP 主要来自肝脏和骨骼。生长期儿童血清内ALP大多数来自成骨母细胞和生长中的骨软骨细胞，少量来自肝。人体各组织ALP同工酶可分为3大类，即胎盘ALP、肠ALP和肝/骨/肾ALP同工酶。 |