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微生物检验中变形杆菌培养鉴定要点(2)

时间:2013-09-25 21:12来源:幸福检验 收集整理 点击:
四、流行病学特点
1、季节性特点
       全年均可发生,大多数发生在5-10月,以7-9月常见。
2、食品的种类
       主要是动物性食品,特别是熟肉以及内脏的熟制品。熟制品被变形杆菌污染通常无感观形状的变化,极易引起食物中毒。
3、食物中变形杆菌的来源
       广泛存在自然界。生的肉类食品,尤其动物内脏变形杆菌带菌率较高,在食品烹调加工是,处理生、熟食品的工具、容器未严格分开,可污染熟制品。或食用前未加热或加热不彻底,食后即引起食物中毒。
 
五、检验
       食品中变形杆菌的检验主要分五个步骤即:分离培养、生化鉴定、血清学检查、变形杆菌菌数的测定、动物试验。
1.分离培养
       将所取样品分别划线接种于肠道菌选择培养基(SS琼脂或D?C琼脂)及鉴别培养基(伊红美兰琼脂或麦康凯琼脂)平板各一个,在37℃的条件下培养18-24小时后,观察菌落特征,变形杆菌的菌落特征是:在鉴别培养基上为无色透明,有的蔓延生长,有的不蔓延生长,在选择培养平板上形成单个菌落,有的菌落边缘呈扩散状,对光观察,菌落周围淡蓝色中心稍厚,打开平皿时有臭味,有粘性,选出可疑菌落,在平皿底部做好标记。
2.生化试验
       选择可疑菌落接种于苯丙氨酸琼堕斜面(爱德华氏改良培养基),37℃培养6-8小时后观察结果,如果苯丙氨酸琼脂斜面变为棕黑色,则为苯丙氨酸脱羧酶阳性,经革兰氏染色镜检,如为革兰氏阴性杆菌,可初步判定为变形杆菌。
3.血清学检查
4.变形杆菌菌数的测定
       菌数的测定方法是将检样在研钵中研磨制成悬液后,以生理盐水对原样品进行1:100,1:1000,1:10000,1:100000等稀释度的稀释。然后以移液管分别移取每种稀释度的悬液0.1ml 接种于琼脂斜面底部的凝结水内,但勿接触培养基斜面表面。在37℃条件下培养24-48小时,观察生长状况。变形杆菌可自下而上弥漫生长,以出现生长的最高稀释度乘以10,则为每克检样中变形杆菌的最近似数。
5.动物试验
       把检样中分离纯化出的变形杆菌培养物,分别饲喂小白鼠或豚鼠、家兔等供试动物,如供试动物出现寒战、竖毛、腹泻等中毒症状则进一步证实为变形杆菌。
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