2.3 采用先进技术,做好病原微生物快速检测和鉴定工作 近年来,病原菌的检测已向标准化、微量化和快速简便等方面发展,随着现代分析技术和分子生物学技术的发展,气相色谱、高效液相、 单克隆抗体、核酸杂交、PCR扩增等技术,已用于病原微生物的快速检测和鉴定,并已取得了相当的效果。
3 加强病原微生物耐药性检测
3.1 规范化使用NCCLS标准进行抗生素药物敏感试验 准确的药物敏感试验对于临床选择适当的抗菌药物非常关键,卫生部规定我国抗生素药物敏感试验应当遵循NCCLS文件进行,随着细 菌对抗生素耐药性的增加、新药的出现、人们对抗生素药理学的不断深入认识以及药敏试验方法的不断拓展,NCCLS文件也在不断更 新,同时对惯用的K-B法的适用范围、局限性、影响因素、质量控制等要有足够的认识,做到抗菌药物敏感试验的规范化[3]。
3.2 耐药性基因检测的应用 随着微生物耐药性的遗传机制的不断深入研究,许多用于检测抗菌药物耐药性的基因检测方法得以发展并在临床实验室应用,耐药性基因 检测能早期指导临床医师治疗用药,准确判断MIC折点,用于细菌耐药性的流行病学研究,快速鉴定慢生长细菌的耐药性,对一些不能 培养或不易培养的微生物耐药性鉴定尤为重要。主要有DNA探针方法和PCR方法,但实际应用主要以PCR方法为主,具体有PCR 扩增试验、PCR限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)分析、PCR单链构象多态性(PCR-SSCP)分析、PCR线性探 针(PCR-LIPA)分析、生物芯片分析、自动DNA序列测定分析等方法。这些分析方法可以用于氨基糖苷类耐药基因、β-内酰 胺药物耐药基因、氯霉素耐药基因、大环内酯类耐药基因、喹诺酮耐药基因等的检测。值得注意的是,检出细菌某种耐药性基因,并不表 明该细菌一定对这种药不敏感,因为该细菌的这种耐药基因不一定得到表达。
3.3 加强微生物耐药性的长期监测 临床微生物室的另一项重要任务就是实施长期的、区域性的耐药监测计划,现在很多微生物实验室都已实行了自动化分析和WHONET 软件的应用,通过计算机分析,我们可以发现本医院、本地区的抗生素耐药特点和耐药趋势,鉴别医院内耐药株的暴发流行和发现一些耐 药机制的特征,并可与国内耐药监测网进行合作与沟通,这对于指导临床经验用药,制定适合本地区抗生素使用策略有着重要意义。
4 加强微生物实验室与临床的联系
微生物实验室发出的检验报告,究竟在临床上发挥的作用如何,需要微生物实验室继续追踪服务。当前,微生物检验技术及基本知识 、细菌耐药性研究进展日新月异,微生物实验室工作人员除了加强自身学习外,还应积极主动地宣传病原学和细菌耐药性方面的新进展, 协助临床医师理解微生物检测和耐药性监测结果的意义,同时听取临床医师对微生物实验室的意见和建议,最大限度地发挥微生物实验室 在抗菌药物规范化使用中的作用。
总之,以病原学监测为基础,根据微生物实验室的试验确定的病原菌种类和病原菌对抗菌药物敏感性应用抗菌药物,是要推动合理使 用抗菌药物、规范医疗机构和医务人员用药行为的重要环节。作为临床微生物实验室,规范临床标本采集,确保标本质量;建立微生物检 验分级报告制度;规范操作,提高培养阳性率;积极采用先进技术,做好病原微生物快速检测和鉴定工作;规范化使用NCCLS标准进 行抗生素药物敏感试验;应用先进技术对耐药基因进行检测;加强微生物耐药性的长期监测;加强微生物实验室与临床的沟通和联系,就 能充分发挥微生物实验室在抗菌药物规范化使用中的作用。
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