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稀释法筛选试验须用BHI。Swenson等［2］的研究认为，肠球菌在MH琼脂上生长较差，结果不宜判定，用BHI结果很清楚，且重复性很好。不能使用加血液的MH培养基，否则抑菌环偏大或假耐药。 3.万古霉素筛选试验：肠球菌对万古霉素的耐药率增加惊人。有报道，1989～1993年，耐药率由0.3％增至7.9%。不仅如此，因常用的自动化仪器和纸片法试验会漏检一些低水平耐药菌株，耐药率还会更高。Tenover等［8］评价了10种试验方法，认为传统的纸片法和几乎所有仪器方法、微量板方法均有程度不同的误差，有的极重要误差高达16％。常量的肉汤或琼脂平板药敏试验方法， 结果可靠。较为标准的万古霉素筛选试验方法如下［12］。(1)条件： 培养基：BHI；药物浓度：万古霉素6 μg/ml；接种菌量：105～106 CFU/接种点；观察时间：18小时初步看结果，24小时读取最终结果。(2)操作：制备含万古霉素6 μg/ml 的BHI平板、备用。待测菌株制成菌悬液，浊度为0.5麦氏管。取菌悬液10μl点种在琼脂平板上，35℃培养过夜，约18小时初步观察结果，接种点有细菌生长，报告耐药。未见细菌生长，继续培养至24小时，仍未生长者报告敏感，生长者报告耐药。 使用筛选法，可以检出MIC在4～8 μg/ml之间的低水平耐药菌株，如酪黄肠球菌和母鸡肠球菌。 五、质量控制 纸片法和稀释法药敏试验，采用敏感的菌株作为质量控制菌株，NCCLS指定用ATCC29212(或ATCC33186)［10］。 对于筛选试验， 目的是检出耐药细菌， 耐药为正结果。实验中， 除了敏感菌株外，还须用耐药菌株作为阳性对照， 进行质量控制。Swenson等［13］建议用ATCC51299作为耐药的质控菌株。该菌株具有万古霉素耐药基因Van B，庆大霉素耐药基因 acc(6′)+aph(2′′)和链霉素耐药基因 ant(6)-I。药敏试验结果：万古霉素 mIC，培养24小时为16～32 μg/ml、培养48小时为 128 μg/ml；庆大霉素和链霉素MIC均 ＞2 000 μg/ml。ATCC29213和ATCC51299的质量控制标准见表4。 表4 筛选试验的质量控制方法及标准
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