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肠球菌的耐药特点及药敏试验方法(3)

时间:2010-03-22 20:37来源:收集整理 点击:

  肠球菌做其他药物的药敏试验一般没有临床意义。

  四、肠球菌的药敏试验方法

  常规实验室做肠球菌药敏试验,有传统的纸片法、稀释法和仪器等快速方法。应针对不同的药物,选择与其相适应的方法。应做的三类药物的实验方法如下。

  1.青霉素药敏试验:用纸片法做青霉素药敏试验,可测青霉素G和/或氨苄西林两个药物。待测菌株制备菌悬液,浊度为麦氏0.5管,菌液涂布MH琼脂平板,贴10 U青霉素G纸片,培养16~18小时后,抑菌环小于14 mm为耐药,大于15 mm为敏感。青霉素G的结果可以预测氨苄西林的结果。因氨苄西林的疗效略好于青霉素,常规也可以测氨苄西林。用10μg氨苄西林纸片,抑菌环大于17 mm为敏感,小于16 mm为耐药[10]

  青霉素药敏试验有时不能准确测出因β- 内酰胺酶产生的耐药性。检测这种菌株,以变色头孢菌素做β-内酰胺酶试验,接种大菌量,结果才可靠。β-内酰胺酶试验和青霉素药敏试验结果可代表肠球菌对所有青霉素类药物及其合剂的敏感性。

  2.HLAR的检测:HLAR菌株对氨基糖类药物表现极高的耐药性,需用筛选试验检测。药物用庆大霉素和链霉素代表。有纸片法和稀释法,见表3[11]

表3 HLAR筛选试验方法

方  法 培养基 接种菌量 孵育时间 庆大霉素 链霉素 判定结果
纸片法 MH琼脂 0.5麦氏管 18~24 h 120 μg/片 300 μg/片 6 mm=HLAR
            ≥10 mm=敏感
琼脂稀释法 BHI 1×106CFU/点 24 h 500 μg/ml 2 000 μg/ml 有生长=HLAR
肉汤稀释法 BHI 5×105CFU/ml 24 h 500 μg/ml 1 000 μg/ml 有生长=HLAR

  BHI:脑心浸液培养基用纸片法筛选,抑菌环在7~9 mm之间不能确定是否为HLAR,需用稀释法确定。

  琼脂稀释法用含药的BHI平板,细菌点种在平板上(药物浓度及菌量见表3),过夜培养后,点种处即便有一个菌落生长也为HLAR。肉汤稀释法用脑心浸液肉汤,常量法或微量法均可,接种的菌量最终使培养基中总菌数为5×10

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