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血液学检验分析前质量控制的重要因素——标本(4)

时间:2010-03-17 23:58来源:未知 点击:

(4)血样保存时应竖直放置以加快凝血。(5)避免晃动血样,产生溶血。(6)贮存中注意避光,尽量隔绝空气。(7)血样深冷冻再溶解后,应重新混匀几次,防止检测物质分布不均。(8)推荐贮存期限,生化检验,冰箱贮存1周;免疫学检验,冰箱贮存1周;血液学检验,室温1天;血液凝固检验,冰箱贮存1天; 毒理检验,冰箱贮存6周。 3.血样预处理:通常未加抗凝剂的血液在30至60分钟内凝血,析出血清,急诊时可用含凝血酶的真空管,采血后5分钟析出血清。血凝完全后,应在1 000~1 200×g下离心10至 15分钟。对于血液凝固检验,应在2 000×g下离心15分钟。制成的血清或浆不可以再次离心。毛细血管血样可以用微量离心机离心,通常在6 000~1 500×g下离心90秒即可。 血样离心后,理想情况下,分析仪的探针直接刺入管子的管盖,吸取血样,从而最大程度上减少了被血液污染的危险(商品出售的SST管内含惰性胶体,离心后在血细胞后血清间形成隔离层,可以直接上机,实现一管操作)。但是,多数实验室必须将血清或血浆分到其它管中,这时,应注意血源性感染的危险。四、血栓与止血实验中标本的质量控制血栓与止血实验对于血液标本的采集、保存、运输等要求更高,其质量的好坏对于实验结果影响更明显,特做说明。 1.标本的采集:尽可能地保证每次采血都在同样的条件下进行。患者应处于平静和空腹状态。情绪紧张、激烈运动、饱食油腻会激活或干扰血小板、凝血因子和纤溶成份。采血人员应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入试管,影响实验结果。采血用品推荐使用真空采血系统。采血时选择较粗的静脉,止血带不应扎得太紧,时间应尽量缩短。从输液三通管取血的做法不可取,因为采取的样品常含小凝血块及污染的组织液,有时尚可混有经此途径给予的药物,比如肝素返流在样品中,可以导致凝血时间不应有的延长。一旦采血完毕,应立即与抗凝剂充分混合,但要避免用力振荡出现溶血。真空采血技术为带盖封闭系统,采血后管中尚有充分空间,可颠倒混匀,确保血液和抗凝剂混合充分。由于静脉穿刺必然会对皮肤、组织和静脉造成一定程度的损伤,严格讲,为了减少组织促凝血酶原激活酶的影响,最初采集的2~4ml血应该弃之,然后再采实验用血。取血量根据检测需要而定。但是,使用传统注射器采血很难做到上述严格要求。如果使用真空采血系统,一次静脉穿刺后,其所采集的第一管血可以用于血生化等其它检验,第二管用于血栓和止血实验。 2.抗凝剂的选择:常用抗凝剂为0.109 mol/L枸橼酸钠。它能有效地阻止因子Ⅴ、Ⅷ 的降解,并可稀释血浆和血液,但需严格按1∶9比例抗凝。真空采血管预置抗凝剂和真空度,真空耗尽自动停止进血,确保1∶9比例。当患者的红细胞压积大于55%时,枸橼酸钠的浓度需要校正。可用如下NCCLS推荐的经验公式进行校正:X=(100-PCV)/(595-PCV)。其中 X是单位体积抗凝血所需的抗凝剂体积数;PCV是以百分数表示的红细胞压积。推荐使用缓冲抗凝剂,特别是对需经冷冻保存后再行分析的标本更为必须。因为无缓冲剂,血浆pH值随时间而增加,凝固时间可延长,特别是Ⅷ因子即使是-20℃保存,其凝血活性也可减少50%。检测血小板功能和肝素监测实验时,推荐使用CTAD液(枸橼酸钠0.11 mol /L,茶碱15 mmol/L,腺苷3.7 mmol/L和潘生丁0.198 mmol/L)。检测纤溶试验和溶栓治疗时,应在普通抗凝剂中加入抑肽酶,以抑制纤溶活化。 3.标本的运输:最好在实验室内采血,或尽快送至检测地点,严防剧烈振动、日光直射和异物落入。如果使用真空采血系统,真空管的管塞可以防止因二氧化碳散失而导致的PH值改变。标本需室温下运送。低温会损伤血小板,至使因子Ⅵ,Ⅺ活化,使APTT和PT缩短。但是有些项目(如β-血小板球蛋白,血小板因子Ⅳ和凝血因子等)需在4℃下运送,以防止因子 Ⅴ和Ⅱ的降解。真空采血系统的真空管均带有管塞,避免运送过程中标本的污染,保证医护人员的安全。 4.标本的处理:标本应尽快离心。一般在15~20℃离心,但纤溶试验需在4℃左右离心。富血小板血浆需慢速离心800×g15分钟;贫血小板血浆需快速离心2 000~2 500×g 30分钟。吸取血浆层的中三分之一的血浆供检测用。有溶血的血浆会引起血小板活化和凝血时间缩短,应弃之不用。使用真空采在系统,可以最大限度地避免溶血。血浆标本原则上应立即检测或当天检测,否则应低温保存。标本的保存时间与保存温度有关,22~24℃保存2小时, 2~4℃保存4小时,-20℃保存2周,-70℃保存6个月。

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