三 尿液有形成分常用检查方法
近10年来,尿液有形成分常用检查方法主要有离心、不离心直接检查法,它们都以定性为主。其它包括定量法、染色法、尿沉渣工作站、荧光染色流式细胞法、体外诊断尿影像分析系统等。现分别叙述如下:
1. 传统的镜检法
混浊的血性或脓性尿及体液,由于离心后红细胞、白(脓)细胞大量沉淀于管底不利于计数,因此可采取直接涂片镜检;而一般尿液及清晰的其它体液均要求离心。问题是离心条件必需标准化,否则结果无可比性。手工镜检的局限性还在于:
(1)重复性差,检验人员主观性强;
(2)步骤繁多,是劳动密集的操作流程(按工时单位制计算每份尿沉渣需时8min);
(3)手工准备标本,无条型码输入数据易造成分析前错误;
(4)增加实验室污染的危险;
(5)需有经验、训练有素的技术人员;
(6)离心条件、显微镜、玻片等未作具体规定;
(7)实验室操作随意性强、标本未标准化留取;
(8)判断结果以定性“+”、“++”、“+++”等为主,缺乏可比性。
2. 标准镜检定量法
针对传统检查法随意性大,结果变异大,判断不标准、结果不统一,无可比性,报告方式可因人而异等问题,中华医学会临床检验学组提出“尿沉渣检验标准化建议”。对材料和器械、标本的收集及运送、尿沉渣检验具体操作步骤,应报告的尿沉渣内容均明确规定。如收集标本的容器、离心管、尿沉渣计数板、离心机(水平式)相对离心力应在400g左右。而显微镜要求有内置光源、光线强度可调、应具备40倍、10倍的物镜。并对标本的收集、运送、接受均作了明确规定。“建议”中的规定适用于各级医疗单位的推广应用。
体液有形成分定量的关键设备为专用体液计数池,如Fuchs-Rosenthal细胞计数池,其深度为0.2mm(面积0.625mm2)。市售有一次性的Fast-Read 10或Kova等尿沉渣定量分析板。
有形成分定量除使用晨尿直接冲入尿沉渣定量分析板外,还可采取定时尿如12h(Addis计数):留取12h尿液,测定尿液中管型,红细胞和白细胞等有形成分后,计算总量,用以了解泌尿系统疾病的发展及预后。近年来为方便病人留取尿标本,规定采用晨5∶30~8∶30内的尿标本,这3h晨尿(不加防腐剂)新鲜及时检查上述有形成分,定时、定速离心、留取定量沉淀物充入计数池后计数,再换算成1h结果,得出1h各有形成分排出数。本法由于时间短,方便病人留标本、对有形成分的影响比12h留尿少,且不受饮食限制以致技术误差少,干扰因素较少;因此适用于门诊或住院病人的连续动态监测,以了解血尿、脓尿治疗效果。有人提出离心法不仅费时,且离心后可致尿有形成分可造成损伤、变形,推荐用不离心尿,在倒置显微镜下观察尿有形成分。方法为在倒置显微镜平台下,将未离心混悬尿放入光洁度好,有一定深度面积的酶标板内、静置规定时间后,待有形成分自然下沉至孔底,在倒置显微镜下高倍计数10个规定区域中的细胞和管型数。国产倒置显微镜、酶标板均易得到,经我们实践浓缩相当离心50倍、阳性率、精确度、与定量尿分析计数板相关性较好,适合基层单位使用,但应注意有形成分的沉淀受尿比密影响、盐类结晶可干扰视野观察。
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