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一、前 言 二、 分析前变异对血脂测定结果的影响 对于血脂测定，应特别注意分析前变异对实验结果的影响，主要来源于： 1.生物学因素：如个体间、性别、年龄和种族等。研究发现，TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoAI、apoB和Lp(a)的平均生物学变异分别为6.1%～11%，23%～40%，7%～12%，9.5%，7%～8%，6.5%～10%和8.6%。 2.行为因素：如饮食、肥胖、吸烟、紧张、饮酒、饮咖啡和锻炼等。 3.临床因素：如 ①继发疾病(内分泌或代谢性疾病、肾脏疾病、肝胆疾病及其他)； ②药物诱导(抗高血压药，免疫抑制剂及雌激素等)。 4.标本收集与处理：如禁食状态、血液浓缩、抗凝剂与防腐剂、毛细血管血与静脉血、标本贮存等。 建议采取以下措施减少血脂和脂蛋白测定分析前因素对结果的影响： 1.血脂分析前受试者应处于稳定代谢状态，至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定。 2.测定前24h内不应进行剧烈体育运动。 3.如血脂检测异常，在进一步处理前，应在两月内进行再次或多次测定，但至少要相隔一周。 4.虽然有人认为TC测定可不用禁食，但应注意饱餐后TC会有所下降；对于TG和其他脂蛋白检测则需至少禁食12h采血。 5.除卧床不起者外，采血时一般取坐位，抽血前受试者至少应坐位休息5min。 6.静脉穿刺过程中止血带使用不应超过1min。 7.血清或血浆标本均适用于血脂、脂蛋白测定，但现在主张一律用血清。如用EDTA作抗凝剂，分离血浆后应马上放在2℃～8℃保存，以防组分改变，测定结果需乘以1.03。 8.血清标本应及时测定，如24h内不能完成测定，可密封置于4℃保存1周，-20℃可保存数月，-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。 三、 血脂测定的方法学 一、测定方法 1.血清TC测定：化学抽提法—ALBK法为目前国际上通用的参考方法。卫生部北京老年医学研究所生化室建立的高效液相色谱(HPLC)法也推荐作为我国TC测定的参考方法。 建议酶法[如胆固醇氧化酶- 过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(CHOD-PAP法)](以胆固醇酯酶水解血清中的胆固醇酯，同时以胆固醇氧化酶将胆固醇氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢，终点产物的测定应用最广的是Trinder显色反应系统，试剂含过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚。)作为临床实验室测定血清TC的常规方法。 2.血清TG测定：目前尚无公认的TG测定的参考方法，二氯甲烷-硅酸-变色酸法是美国疾病预防与控制中心(CDC)测定TG采用的参考方法。卫生部北京老年医学研究所建立的HPLC 测定总甘油和游离甘油的方法拟推荐为我国TG测定的参考方法。 建议酶法[如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP 法)]作为临床实验室测定血清TG的常规方法。一般临床实验室可采用一步GPO-PAP法，有条件的实验室(如三级以上医院)应考虑开展游离甘油的测定或采用两步酶法。 3.血清HDL-C测定：超速离心结合ALBK法为HDL-C测定的参考方法。硫酸葡聚糖-镁沉淀法(DS法)结合ALBK法被美国胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)作为指定的比较方法(DCM法)。1995年中华医学会检验分会曾在国内推荐的 磷钨酸镁沉淀法(PTA-Mg2 + 法)，但此法的主要缺点是标本需预先离心处理，结果易受高TG影响。 建议匀相测定法作为临床实验室测定血清HDL-C的常规方法。可供选择的方法主要有：清除法(Clearance method)，PEG修饰酶法(PEGME法)，包括反应促进剂-过氧化物酶清除法(SPD法)和过氧化氢酶清除法(CAT法)，选择性抑制法(PPD法)，免疫分离法(IS法)包括PEG/抗体包裹法(IRC法)和抗体免疫分离法(AB法)。 4.血清LDL-C测定：超速离心结合ALBK法为LDL-C测定的参考方法。 |