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【摘要】目的 分析痰标本真菌涂片和培养阳性结果对侵袭性肺部真菌感染的诊断价值。方法 我院２５０６ 例患者送检的合格痰标本，均涂片镜检真菌孢子和菌丝，并做真菌培养。其中酵母样真菌进行半定量计数并经ＶＩＴＥＫ ２ Ｃｏｍｐａｃｔ ６０ ＹＳＴ 卡鉴定；丝状真菌则主要根据形态学鉴定到种。所有痰标本真菌检测阳性结果分为以下四类：Ａ 为同一患者两次以上涂片均可见菌丝，且培养出同一种真菌；Ｂ 为同一患者两次以上培养出同一种真菌，但涂片未见菌丝；Ｃ 为单次涂片可见菌丝，真菌培养半定量≥ ＋＋＋；Ｄ 为单次真菌培养半定量≥ ＋＋＋，但涂片未见菌丝。收集所有入选患者的临床资料，并按照“侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则（草案）”进行分析。结果 共检出１４７ 例酵母样真菌，Ａ 组患者仅２３ 例，其中１１ 例（占４７.８３％，１１/２３）符合侵袭性肺部真菌感染的确诊或临床诊断标准；１２４ 例Ｂ、Ｃ、Ｄ 组患者中只有１ 例同时血培养阳性、２２ 例为拟诊患者，其余１０１ 例（占８１.４５％，１０１/１２４）均没有临床诊断的参考价值。３６ 例痰标本丝状真菌检测阳性患者中，Ａ 组患者１１ 例，其中７ 例（占６３.６４％，７/１１）符合确诊或临床诊断标准，５ 例Ｂ 组患者均符合拟诊标准，而２０ 例单次检测阳性的Ｃ 组和Ｄ 组中仅有６ 例符合拟诊标准。结论 两次以上痰标本真菌检验阳性具有较高临床诊断价值，因此重复检验非常必要，而单次检验阳性临床诊断价值不大。丝状真菌阳性检测结果临床价值远高于酵母样真菌。
【关键词】念珠菌属； 丝状真菌； 真菌感染； 痰
本文图：略
近年来由于造血干细胞移植（ＨＳＣＴ）、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用、一些慢性病住院时间延长以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性肺部真菌感染的发生率和病死率逐年增加。由于侵袭性肺部真菌感染的临床表现缺乏特异性，仅根据临床症状诊断非常困难，临床微生物学检验结果对侵袭性肺部真菌感染的早期诊断和及时治疗非常关键。痰标本真菌涂片和培养仍然是目前临床微生物室侵袭性肺部真菌感染检验的常规方法，虽然中国侵袭性肺部真菌感染工作组结合中国国情制订了我国侵袭性肺部真菌感染诊疗原则，但在临床实际应用过程中，对痰标本真菌涂片和培养的临床价值依然存在争议。为此，我们回顾性分析了２０１０ 年１ 月至１２ 月我院２５０６ 例患者送检痰标本真菌涂片和培养结果，并结合患者因素、临床特征以及病理和无菌体液培养结果等，对其临床价值进行了探讨，报道如下。
一、材料和方法
１．标本来源：２０１０ 年１ 月至１２ 月我院２５０６ 例患者送检的合格痰标本。主要来自血液科、呼吸科、重症监护科、保健科、血液净化科、神经外科、泌尿外科移植病区等住院患者，患者除原发病外多有肺部感染表现。
２．真菌涂片与培养：所有痰标本均涂片，革兰染色后镜检，按照枟全国临床检验操作规程枠（第三版）标准判断标本是否合格，油镜下观察１００ 个视野，记录正常菌群、细胞吞噬、可疑病原菌及真菌孢子和菌丝情况，并发初步报告。合格标本接种哥伦比亚血琼脂、万古霉素巧克力琼脂（３５ ℃ ５％ ＣＯ２ 培养）、ＳＤＡ琼脂（２５ ℃培养）、麦康凯和念珠菌显色平板（３５ ℃培养），培养基均购自济南百博生物技术公司，每日检查培养结果，５ ｄ 后无真菌生长报阴性。
３．酵母样真菌半定量计数并鉴定：根据三区划线各区菌落数进行半定量计数（ ＋ ～ ＋＋＋＋）， ＋＋＋以上酵母样真菌根据平板显色和分纯后ＶＩＴＥＫ ２ Ｃｏｍｐａｃｔ ６０ ＹＳＴ 卡（生物梅里埃公司产品）鉴定到种。
４．丝状真菌形态学鉴定：根据菌落形态和透明胶带法乳酸酚棉蓝染色镜检所见分生孢子、产孢结构及顶囊等的形态、结构、数目等鉴定到种，必要时做小培养 。
５．所有真菌检验阳性结果均归类为以下四种情况：Ａ 为同一患者两次以上涂片均可见菌丝，且培养出同一种真菌；Ｂ 为同一患者两次以上培养出同一种真菌，但涂片未见菌丝；Ｃ 为单次涂片可见菌丝，真菌培养半定量≥ ＋＋＋；Ｄ 为单次真菌培养半定量≥ ＋＋＋，但涂片未见菌丝。
６．临床资料收集分析：收集所有入选患者的临床资料，包括年龄、性别、病区、主要诊断和其他诊断以及各种宿主因素、主要临床特征和次要临床特征等，结合痰标本真菌检验结果，按照枟侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则（草案）枠（以下简称“草案”），将患者划分为确诊、临床诊断、拟诊和其他等四组。
７．统计学分析：所有真菌检验结果均输入ＷＨＯＮＥＴ ５.４ 软件进行统计分析。 |