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细菌鉴定碳水化合物代谢试验应用及意义(2)

时间:2010-11-05 10:48来源:幸福检验 xf366.com 点击:

  (3)结果:培养基完全变黑为阳性,不变黑为阴性。

  (4)应用:主要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别,以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌(如脆弱拟杆菌等)的初步鉴别。D群链球菌本试验为阳性,其它链球菌为阴性。

 

甲基红(MR)试验

  (1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等,使培养基pH下降至4.5以下时,加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其它物质(如醇、醛、酮、气体和水),培养基pH仍在6.2以上,加入甲基红指示剂呈桔黄色,为阴性。

  (2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。

  (3)方法:将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中,35℃孵育48h~96h后,于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂,立即观察结果。

  (4)结果判定:呈现红色者为阳性,桔黄色为阴性,桔红色为弱阳性。

  (5)应用:常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别,如大肠埃希菌和产气肠杆菌,前者为阳性,后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性,而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。

 

V-P试验

  (1)原理:测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。某些细菌如产气肠杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性条件下,乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰,进而与培养基内蛋白胨中的精氨酸等含胍基的物质结合形成红色化合物。即V-P试验阳性。

  (2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。

  (3)方法:将待检菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃孵育48h,加入6%α-萘酚乙醇溶液和40%KOH,振摇。

  (4)结果:在数分钟内出现红色者为阳性,如无红色出现且于35℃4小时后仍无红色为阴性。

  (5)应用:主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。本试验常与甲基红试验一起使用,一般情况下,前者为阳性的细菌,后者常为阴性,反之亦然。但肠杆菌科细菌不一定都这样规律,如蜂房哈夫尼亚菌和奇异变形杆菌的VP试验和甲基红试验常同为阳性。

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