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液体双试剂测定血氨在全自动生化仪上的运用(2)

时间:2010-04-18 11:02来源:收集整理 点击:

  标本浓度=X1×V1+X5×V5   V1+V5

  计算,在同一工作日内完成测定工作,每个浓度标本重复测定4次,计算平均值,记录结果。通过判断离群点,结果显示,血氨线性可达321μmol/L,=3.465X+0.98,r=0.9997。

  2.6  精密度试验  取一份血浆样本分别作批内、批间测定20次,批内=38.5μmol/L,S=1.22,Cv=3.4%,批间:=36.7,S=3.21,Cv=8.7%。

  2.7  参考值  取健康人清晨空腹血样60例,男女各半,采用肝素锂抗凝剂,年龄在14~45岁之间,用本方法测定血氨水平,以±2SD为参考范围。结果男女差异无显著性,参考值为:10.5~44.1μmol/L。

  3  讨论

  3.1  从表1中可看出,pH越接近7.4,测定值越能反映样本中真实血氨的浓度,偏离7.4,结果偏低。主要原因是血液中游离氨以NH+4和NH3两种形式存在,是两种形式的总量,是两种形式处于平衡状态。在pH 7.4时,98%以NH+4形式存在,因此,维持试剂溶液的pH为7.4,保证了血氨测试的准确性及稳定性。

  3.2  抽样时应用肝素抗凝剂,不宜用枸橼酸钠抗凝剂,因为枸橼酸钠抗凝剂分解出H+离子,从而使血氨测定值偏高。我们对20例病人用两种不同抗凝剂(一种是肝素锂,一种是枸橼酸钠)进行抽样,离心10min,转速3000 r/min,同时测定血氨浓度,结果显示,枸橼酸钠抗凝管的血氨浓度平均偏高82个u。

  3.3  目前使用的血氨干粉酶法试剂盒的参数不符合全自动生化分析仪条件要求[2],用半自动生化分析仪进行分析干扰因素太多,加样器、试管、溶剂等因素都对血氨结果产生正干扰。且干粉试剂溶解后使用有效期短。为克服此缺点,使血氨试验真正适合全自动分析,我们对试剂配方进行研究发现,血氨测试是否准确,试剂Ⅱ中GLDH酶活力的稳定十分关键,使用双试剂,分开保存NADH和GLDH,用50%甘油配制试剂Ⅱ,同时在试剂Ⅱ中加入一些EDTA-Na,防止金属离子的干扰,测试时试剂临时混合,有效提高试剂的有效期,完全符合全自动生化仪的参数设置。

  3.4  在测试过程中,交叉污染及环境等因素会影响试剂中酶的活力,加上标本测试较少,因此,上机试剂装载量不宜配制过多[3],以本科室工作量适当配制,同时做好室内质量控制,发现失控时即可更换试剂,保证结果的可靠性。

参考文献
   [1] 钱均.临床生物化学和生物化学检验实验指导[M].2版.北京:人民卫生出版社,2003:56-65.
  [2] 石寅皓.全自动生化分析仪限额参数的设置[J].临床检验杂志,1998,16(2):95-96.
  [3] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].2版.南京:东南大学出版社,1997:235-236.

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