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为了解决胆红素试剂的稳定性，尽量排除基质效应对测定的影响，本科采用了双试剂方法测定。现报告如下。 1 材料与方法 1.1 试剂组成 Trace试剂。总胆红素试剂A:盐酸0.1mol/L，对氨基苯磺酶0.050mol/L，表面活性剂1%;试剂B:亚硝酸0.072mol/L;直接胆红素试剂A:盐酸0.165mol/L，对氨基苯磺酶0.029mol/L;试剂B:亚硝酸0.072mol/L。 1.2 试剂配制 1.2.1 TBil单试剂法（TB 1 ） 试剂A:试剂B=50:1，使用前混合。 1.2.2 TBil双试剂法（TB 2 ） 第一试剂R 1 为A;第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水50:1配制使用。 1.2.3 DBil单试剂法（DB 1 ） 试剂A:试剂B=100:1，使用前混合。 1.2.4 DBil双试剂（DB 2 ） 第一试剂R 1 为A:第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水100:1配制使用。 1.4 测定主要参数 见表1。 2 结果 2.1 方法比较 本方法与改良J-G法比较，改良J-G法（见全国临床检验操作规程第二版）为手工操作，设为Y，n=40，TB浓度2.76～456.3μmol/L，Y TB =0.995X TB +1.680，r=0.999，DB浓度0.89～402.8μmol/L，Y DB =1.011X DB +1.612，r=0.9984。
2.3 回收试验 取已知定值血清加入一定量标准品，测定其回收率，总胆红素回收率96.8%～102.7%，平均为99.5%;直接胆红素回收率为96.6%～103.2%，平均为98.8%。 表1 康宁560主要参数 注:ˇλ1为主波长，λ2为副波长，双试剂第一时间点为样品空白读数 2.4 线性试验 按NCCLS线性评价方法 ［1］ ，取TB、DB含量分别为:高值470μmol/L、410μmol/L;低值6.7μmol/L、3.6μmol/L的血清高低值等量混合得中值，中值血清与高低值血清等量混合得五种不同浓度的样品，对其进行测定，测得值（Y）与理论值（X）作统计学处理，回归方程Y TB =0.9973X TB -0.4965，r=0.9993;Y DB =1.016X DB +1.278，结果表明TB、DB分别在0～470μmol/L、0～410μmol/L范围内测定线性良好。 2.5 单双试剂对比试验 按NCCLS评价方法 ［2］ ，取50例TB、DB含量不同的血清标本（TB0.97～462.3μmol/L，DB0.54～398.2μmol/L），以本法（Y）和改良J-G（X）法同时测定，对结果进行统计学处理，回归方程分别Y TB =1.001X TB +0.489;（r=0.999）配对t检验，t=1.28<1.96，P>0.05两法测定差异无显著性，Y DB =0.987X DB +1.8751r=0.998;配对t检验，t=1.53<1.96，P>0.05两法测定差异无显著性;说明TB、DB双试剂测定方法与J-G测定方法一致性良好。 2.6 单、双试剂测定胆红素的比较 按NCCLS干扰试验评价方法 ［2］ 在常规标本中选择正常血清120例，溶血标本40例:Hb1.0～6.0g/L，脂血标本（脂浊度在±～3+）TG为1.89～12.7mmol/L;黄疸标本50例（TB26.9～469.1μmol/L， DB11.6～387.5μmol/L）同时用两种方法测定，结果见表2，由表2显示:溶血、脂血样品TB 1 、DB 1 明显高于TB 2 、DB 2 ，无黄疸标本DB 1 也明显高于DB 2 ，黄疸标本两法间差异无显著性，结果与文献 ［3］ 基本一致。 2.7 试剂开瓶试验 由表3显示，工作试剂单试剂在7天后使胆红素测定结果明显偏低，双试剂的工作试剂在60天内无明显变化，（注: ˇ 试剂配制后测定时间均在室温状态下操作，工作完成后再把工作试剂放回2℃～4℃冰箱）。 表2 单、双试剂测定胆红素的比较 |