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全自动生化分析仪及其试剂间污染对检测的影响

时间:2010-03-27 16:29来源:收集整理 点击:

一、试剂间化学污染的来源

    全自动生化分析仪发展迅速,具有多项目、多样本的处理能力,检测速度不断的提高,但由于共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯,当生化仪长期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化仪内污垢的积聚、测试顺序安排不当,且常规清洗不能有效消除交叉污染时,就会增加试剂间化学污染的可能性,引起测定结果不准确。

    1.试剂针污染:目前大多数全自动生化分析仪采用双试剂检测样本,,试剂R1、R2的吸取与吐出,一般分别只配有一套试剂针。当试剂针在清洗不完全,或黏附力增加时,残留试剂可能会对下一相临检测结果造成影响。

    2.搅拌棒污染:在试剂与样本混合后,往往需要搅拌棒加以混匀,而搅拌绑若清洗不完全,或黏附力增加时,残留试剂可能会对下一相临检测结果造成影响。

    3.比色杯污染:生化分析仪的比色杯一般是循环使用的,每个比色杯检测完毕后,进行清洗,然后继续下一个检测项目的检测。当某个比色杯清洗不完全时,吸附在比色杯上的上一个项目的残留试剂,可能会对在这个比色杯中进行的下一个项目的检测结果造成影响。

以上3种可能的污染,以比色杯污染最为严重,因此比色杯最难以清洗干净,且在实际工作中难以判断该比色杯上一测试的项目;试剂针吸量较大,亦难以清洗干净。

二、试剂间化学污染的类型

    试剂间化学污染的原因很多,常见的类型主要有以下几种:

    1.试剂成分的直接污染:上一测定试剂中含有下一测定所需要测定的物质,直接干扰下一检测的测定结果。如:AMY试剂中含有较高浓度的Ca2+ ;ALP(IFCC法)、CK(NAC法)、CK-MB(NAC法)、CO2(PEPC法)、AMY(EPS法)、TG等试剂中含有Mg2+;GLU(氧化酶法)、TP、ACP试剂中含有较高浓度的K+;ChE、CHOL、GLU(GOD法)、UA(尿酸酶法)、LDH(IFCC法)、HBDH(DGKC法)等试剂中含有磷酸缓冲液;CHOL、TG、HDL-C试剂中含有胆酸钠;AST(IFCC法)、ALT(IFCC法)、试剂中含哟高活性LDH;以上试剂的交叉污染就会分别对Ca2+、Mg2+、K+(紫外酶法)、P、TBA、LDH的测定结果造成干扰。

    2.试剂成分参与反映:上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而干扰下一反应的测定结果。如:(1)镁测定试剂的络合剂亦能与铁结合,影响铁有铁络合剂的结合;(2)直接胆红素(重氮法)试剂含EDTA,镁试剂中含有EGTA,均能与Ca结合,从而Ca的测定;(3)以甘油作为酶保护剂的试剂,回对TG的测定带来干扰;(4)钙(MTB法)试剂对钾有负干扰;(5)CHOL试剂中含有胆固醇酯酶,可水解胆固醇酯形成游离胆固醇,而引起对游离胆固醇测定的干扰。

    3.反应进程相同:上一试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。如:(1)当上一个反应产物为H2O2时则对以Trinders反应产生颜色的测定结果引起干扰。如UA对CHOL结果的影响;CHOL对CREA(酶法)测定结果的影响;GLU(氧化酶法)对CREA测定结果的影响。(2)CK(NAC法)、CK-MB(NAC法)试剂中含GLU成分,其分析方法的原理中GLU的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对GLU的测定带来干扰。

    4.影响反映条件:影响下一项目的反应条件如pH等,从而改变反应速率。如:(1)直接胆红素(钒酸盐氧化法)试剂中含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活性,对测定结果有负干扰。(2)CREA(苦味酸速率法)反应条件为碱性,果糖胺(动力学法)反应条件为酸性,受到污染后反应速率会减慢。(3)CREA(酶法)史试剂中含有抗坏血酸氧化酶,影响了氧化还原反应的进程,回对 TBA(酶循环法)测定结果有影响。

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