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1.6 Ca、Mg的分析方法操作手册为一点终点法，仪器的工作参数为两点终点法。 1.7 样品/试剂比值的变更直接关系到该项目的检测线性范围，在工作中发现CK、AMY经常超出线性范围，如果将样品/试剂的比值分别由原来的1/25和1/50改为1/50和1/75，经复合校准品校准后，在日常的工作中能得到更宽的线性范围，实践证明是可行的。在日常工作中发现正常人的DBIL往往出现负值或偏低，经查发现一个DBIL为4.24 μmmol/L的样品在测量过程中用于计算其值的单位时间吸光度变化值仅为0.000 4，任何一点干扰均可以影响该结果，建议将DBIL的样品/试剂由原来的1/35改为1/25，虽然该方法的线性范围变小，但直胆大于500 μmmol/L样品可以通过稀释后再测定得到解决。 2 全自动生化仪的校准问题 2.1 任何一台全自动生化分析仪的工作中测定的每一个项目都离不开一个或多个已知其含量的参照物(我院CKMB除外)，这一参照物就是我们日常工作中使用的校准品。我科使用的是罗氏复合校准品，干粉状态2 ℃～8 ℃可保存至有效期，稀释后立即分装成200 μl～300 μl存放在-20 ℃环境下，可使用至有效期，但在使用中发现了几次因为人为因素导致用其校准的系数测得的样品严重偏离了正常人均值，将该校准品当样品测量后发现多项目偏离了其靶值的20%以上，经查明原来该校准品的保存中存在问题(多次反复冻融，并在室温下多次开盖检测，TBIL和DBIL下降显著，部分项目因多次暴露，水分蒸发导致结果增高)，但另一次Mg的校准值偏离太大应引起操作人员的重视，罗氏校准品(批号169826)复溶后即时分装，1周后，用其中一份当样品测定校准的所有项目后发现其他项目正常而Mg为0.21 mmol/L(靶值：1.12 mmol/L)，后用5份测定发现Mg的批内变异率均值>25%。经多次校准后再反测发现Mg的重复性存在严重问题，经反复试验发现：试剂的稳定性存在严重问题，质控的实测值逐渐下降，每天校准都不能让校准品的回测值接近靶值的95%，开瓶30 d的试剂空白吸光度值就大于或接近了0.850。我院HITACHI 7080自动生化分析仪使用的四川迈克液体双试剂(MTB法)批号0905051，有效期至2006年10月20日，其方法为终点法，样品/试剂为1/60，主波长582 nm，反应温度37 ℃，反应时间10 min，用靶值为1.12 mmol/L的罗氏校准品刚校准后即用该同一管校准品作为样品检测，测得5次均值为1.41 mmol/L(偏高25.89%)，经查阅仪器上Mg校准后的K系数为8 421，1.12/8 421得Mg的单位时间内计算吸光度变化值仅为0.000 133，是7080生化项目中最小的。作者认为太小的吸光度变化是导致该项目重复性太差的根本原因，通过增大样品/试剂的比值来提高吸光度变化值，提高样品吸光度变化值与仪器本身吸光度变化值的比值，减小因仪器系统误差导致的吸光度改变对样品测量的重复性的影响，但事实上因为试剂自身的不稳定导致的吸光度变化值下降到接近仪器因系统误差所产生的吸光度变化值时，通过增大样品/试剂的比值来提高某项目的重复性是不能解决问题的。Mg更换新试剂后，再校准，再将该校准品当样品测定，当天其CV值能控制在5%以内，与试剂供应商联系得知Mg试剂的稳定性存在严重问题，是其方法学存在缺陷，建议我院在Mg试剂不用时即时将其密闭并闭光保存在2 ℃～8 ℃环境下，并经常校准可得到克服。实践证明，以上建议让Mg试剂的稳定性能得到较短时间内的稳定，但给工作带来了不少的麻烦。 2.2 校准不要轻易进行 当质控出现失控时，不要草率决定立即进行校准，因为导致质控失控的原因是多方面的，包括质控品批号出错，质控品过夜吸水稀释(HITACHI 7080在夏天时，其质控样品室内常有较多的冷凝水滴入质控样品杯中，导致质控项目测定值全部下降)、水分蒸发浓缩(HITACHI 7020的质控品位于样品盘中，温度是室温，质控品放置过夜)、见光分解(TBIL、DBIL)和试剂更换出错或添加试剂出错。作者常将校准品当样品测定，如果其值基本上与靶值一致，可以排除试剂、供水水质和仪器的问题，只有在质控上找原因，反之，我们可以重新开一瓶新的校准品，用其作为样品来测量，一方面可以了解校准品的稳定性和使用者稀释操作是否很精确，实践证明罗氏校准品在其有效期内，用电阻值大于5兆欧的纯净水复溶后立即分装并密闭存放在20 ℃环境下是十分稳定的。如果出现了个别项目偏差太大，建议更换新试剂后再测定校准品；如果结果不理想，请查仪器分析参数是否被改动；如果分析参数正常，可能是试剂的批间差太大，建仪即时校准。 |