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四款不同流式细胞仪选购分析比较

时间:2013-09-20 20:46来源:幸福检验 收集整理 点击:
 流式细胞分析技术在现代细胞分子生物学研究中起着越来越重要的作用,这种分析技术是通过对单个细胞性状的快速测定,并结合先进的计算机分析系统,使得在短时间内可对大量细胞进行定性、定量测定。但以往进行流式细胞仪操作和分析需要技术熟练的研究团队,而且这一设备价值也不菲——起码也要10万美元,有些甚至达到50万美元,这对于许多实验室来说并不容易负担。
 
近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪,不单将原本需要一支工程师队伍进行安装的大型设备压缩成为可以单人运送的紧凑型仪器,并让这一原本需要专人专业培训才能上手的复杂技术变得更加容易操作,而也价格也更加实惠——目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的, 相关试剂盒也经过了多次验证,简化了操作,降低了入门门槛。一些大型的公司,比如Sony和BD加大了研发力度,开发出了10万美元以下的流式细胞仪,在美国其客户群开始由中心实验室转向了个人实验室。
 
虽然简化了操作,但是这些新型的流式细胞仪也不是说就能立即上手的,用户在购买之前要弄清楚这一技术到底能做什么,不能做什么,有时实验室购买了流式细胞仪后觉得又不适用了,这样即浪费资源,也耽误时间,因此了解自己需要什么,了解不同仪器的优缺点十分重要。以下是目前市面上较受关注的几个新型流式细胞仪,通过分析它们的优点和缺点,也许您在选购的时候就更有目的性了。
 
代表着流式细胞仪重要创新、市场上第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统,是一款由美国能源部国家实验室(洛斯阿拉莫斯国家实验室)研制的新型流式细胞分析仪,去年春天由ABI(Life Technologies)公司投入到了市场,不单荣获了The Scientist杂志2010十大创新技术,也被生物通读者投票入选2010年生物通生命科学十大创新产品。
 
流式细胞仪的原理在于让细胞逐个穿过激光检测设备,从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测。过去,研究人员必须在其灵敏分辨率和样品进样分析速度两者之间二选一,取其平衡点。原因在于传统的流式细胞仪由快速流动的鞘液流带动样品轴流经过激光检测器。要加大样品进样分析速度就必须加大样品轴流直径,这意味着样品流中细胞分散度扩大,细胞容易偏离激光检测焦点——细胞偏离激光中心越远则激发光强度变化越大,CV值越高——这就导致样品分辨率下降——因此过去往往要为灵敏度而牺牲通量。
 
Attune声波聚焦流式细胞仪通过一个看似简单的原理——利用超声波(超过2 MHz,类似于医学成像中使用的超声波)将细胞紧密聚集在激光检测点的样品轴流中轴线上,避免细胞随轴流加宽而分散。这种声波聚焦在很大程度上与样品进样流速无关,不论样品流与鞘液流的比例如何,都可以使细胞紧密地聚集于激光检测焦点,避免分散。即使是在高达1 mL/min的高样品流速下,照样可以维持精确的细胞排列——Attune流式细胞仪实现了在高进样流速下的高精确检测,能够同时将速度和分辨率最大化,并在检测点开展cell-by-cell的细胞分析,解决了过去需要在灵敏度和速度之间折中的这个矛盾。所获得的数据CV值低,峰更窄,峰分辨率高,分离更好,且数据更易阐释。
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