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除对阴道加德钠菌形态学鉴别外，还可进行阴道菌群检查，由于细菌性阴道貌岸然病时乳酸杆菌减少，加德钠氏菌的厌氧菌增加，可计算乳酸杆菌和加德钠菌的数量变化，作为本病诊断参考。一般取阴道分泌物涂片，革兰氏染色，用油镜观察3-5个视野，计算各种菌的数量。乳酸性杆菌为革兰氏阳性大杆菌，（1-5）μm×1μm，常成双，单根、链状或栅状排列，非细菌性阴道病乳酸杆菌>5个/油视野仅见少许加德钠菌。细菌性阴道病不仅可见到加德钠菌，还有其它革兰氏阴性或阳性杆菌，无乳酸杆菌或小于5个/油镜视野。 寻找阴道分泌物中的线索细胞，是诊断加德钠菌性阴道貌岸然病的重要指标。线索细胞为阴道鳞状上皮细胞粘附多数加德钠菌所致生理盐水涂片可见该细胞边缘呈现锯齿状。细胞已有溶解，核模糊不清，其上附着大量加德钠菌及厌氧菌，使其表面毛糙，有斑点和大量的细小颗粒，亦右用吖啶橙染色法或相差显微镜观察法检查线索细胞。此外还可用培养、荧光板、气-液色谱分析和PCR方法等助诊。 （五）衣原体 泌尿生殖道沙眼衣原体感染是目前很常见的性传播疾病之一，国外报道生殖道感染率为10。8%，由于感染后无特异症状，易造成该病流行，引起子性急性阴道炎和宫颈炎。及原体感染的白带脓性粘液，与细菌感染的脓性白带不同。取脓性分泌物涂片，吉姆萨染色，有进时可见到细胞内包涵体，但阳性率很低。过去采用传统的组织培养分离衣原体的方法，技术难度大，特异性敏感性均不理想，且费时费钱。目前应用较多的是荧光标记的单克隆抗体的直接荧光抗体法，可快速确定系何种血清型衣原体敏感。80年代发民展的DNA探针技术，可将阴道分泌物经PBS稀解，离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解，酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针，如外膜蛋白基因的高度保守序列，或TE-55DNA探针等进行斑点杂交，可检出沙眼衣原体的15个血清型，而与其它细菌，病毒、立克次体等无交叉反应，敏感性和特异性均为95%左右。DNA探针方法对泌尿生殖道衣原体疾病的诊断、流行病学调查和无症状衣原体携带者的诊断很有意义。 （六）病毒 在人类性传播疾病中有相当一部分是由病毒引起的。可从阴道分泌物中检测的病毒有： 1．单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV）有二个血清型，HSV-I和HSV-Ⅱ型。引起的生殖道感染的以Ⅱ型为主，约占85%。表南为生殖器官疱疹，溃疡并通过胎盘引起胎儿感染，发生死胎、流主和畸形。实验诊断多取病损处分泌物涂片进生细胞学检测、病毒培养或荧光抗体检测。在孕期感染的监测中，可采取宫颈部位分泌物做包涵体检查。单纯疱疹病毒以侵犯军团颈鳞状上皮多见。感染早期细胞轻度或中度增大，核呈嗜碱性不透明的匀质状毛玻璃样外观，偶伴有核空泡化。由于核的增殖与胞质肿大而形成多核或巨大细胞。感染晚期可发现细胞核内有嗜伊红包涵体，周围有透明晕，由于阴道分泌物检查阳性率低，病毒培养操作复杂费时，近年来对HSV的检查主要采用荧光抗体检查或分子生物方法诊断，特别是利用HSV基因组中特异性强的DNA片段棗HSV-I和HSV-Ⅱ，胸腺激酶的寡核苷酸探针和RNA探针进行分子杂交，可快速而灵敏地对HSV感染作出诊断。 2．人巨细胞病毒（human cytmegalovirus,HCMV）是先天感染的主要病原。一次感染后终年潜伏于体内，在机体免疫力低下时病毒激活，可表现为巨细胞包涵体病。孕期胎儿中枢神经系统受到侵犯可致小头畸形、智力低下、视听障碍等后遗症。故孕妇阴道分泌物巨细胞病毒检查对孕期监测尤其是重要的，常用宫颈拭子采取分泌物送检。HCMV实验室诊断方法除传播病毒离法外，光镜检测包涵体阳性就绪极低，电镜可直直接见到典型的疱疹病毒类形态结构，但无特异性，目前可采用CC-ABC法，即将标本接种于人胚肺成纤维细胞培养细胞，使病毒在敏感细胞中增殖，培养2天后收获，再用针对HCMV早期抗原的单克隆抗体，利用生物素亲和素放大作用染色鉴定。亦可用HCMV、DNA片段或RNA探针与样品进行斑点杂交，夹心杂交或 PCR后勤部的分子杂交来检测，临床最常用的方法是用ELISA法检测孕妇血清 HCMV-IGM来诊断活动性感染。 |