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凝聚胺法和微柱凝胶法交叉配血结果的比较

时间:2013-09-30 20:51来源:幸福检验网 收集整理 点击:
 准确的血型鉴定及交叉配血是临床安全,有效输血的重要保证。微柱凝胶法(MGT)是近年来新发展的一项免疫学检测技术。与手工凝聚胺(MPT)法相比。MGT法具有操作简便、易观察、易保存等优点Ⅲ。笔者就MGT法和MPT法交叉配血进行比较,现报道如下。
 
对象与方法
l检测对象选择本院2010年1~6月住院输血的患者共967例。
2试剂凝聚胺试剂由台湾Baso公司提供;微柱凝胶卡、专用离心机和孵育器均由长春博研科学仪器公司提供;不规则抗体筛选红细胞悬液、抗A、抗B血型定型试剂(批号20090706,有效期20110705)、人AB0血型反定型试剂(批号20105315。有效期20100827)均由上海血液生物医药公司提供。
 
3方法
3.1 试管法(复查对照)检测ABo、RhD血型。
3.2 MGT法检测ABO、RhD血型按试剂说明书操作。
3.3 MPT法交叉配血:按《全国临床检验操作规程》(第3版)要求操作。
3.4 MGT法交叉配血:抽取患者EDTA抗凝血2~3 ml,离心分离出血浆.取压积的红细胞10 ul配成0.8%悬液。将主侧、次侧37℃孵育15 min后离心5 min后观察结果。
 
结果
1 MGT法与试管法检测患者ABO血型的结果2种方法在检测一般患者ABO血型时结果一致;但试管法在检测抗原明显减弱者的AB0血型时,正定型需在显微镜下才能见到很微弱的凝集块。4例(其中A型,B型、AB型和B型各1例分别编号为1,2,3,4)抗原明显减弱患者标本ABO血型检测结果见表1(略)。
2在967例交叉配血试验中MGT法发现6例阳性标本,对配血不合者重复试验,并与MPT法配血结果比较.MPT法检测出2例阳性标本。2种方法结果对比见表2(略)。
 
讨论
MGT法已成为输血检查的推荐方法,它是凝胶过滤技术和抗原抗体反应的结合。与MPT法比较:(1)该方法灵敏度高、结果更准确,交叉配血时其灵敏度较MPT法高l~5个滴度,能捕捉到十分微弱的抗原抗体反应。(2)操作易掌握、结果稳定、重复性好.受人为因素的影响小。(3)标本用量少且保存时间长。(5)增加了孵育步骤,减少了冷凝集对实验结果的影响。
 
本文应用MGT法检测了967例住院患者的人ABO、RhD血型,并同时采用试管法进行比较.检测结果显示.MGT法(尤其置37℃预先反应)检测患者ABO血型的敏感性高于试管法。这可能由于试管法在检测白血病和恶性肿瘤等疾病患者红细胞血型时,凝集强度会明显减弱。造成这种现象的原因是:H转移酶缺乏或合成受抑制,使血型抗原减弱;此外,白血病时白细胞呈病理性增生,幼稚红细胞大量增殖,成熟红细胞显著减少及红细胞形态发生改变,也使血型抗原减弱。另外。试管法还可因加入定型血清或红细胞悬液时剂量不标准及不同操作者判断结果的标准不同而产生误差。白血病患者等血型抗原减弱者可适当增加患者红细胞悬液的浓度(由0.8%增加到2%),或将患者2%的红细胞悬液50ul与抗A1、抗B定型血清50ul混合.置37℃预先反应15~30 min。然后采用MGT法检测,这样可提高AB0血型鉴定的准确性和输血安全。
 
MPT法与MGT法配血结果基本相同.实验发现2种方法都是次侧配血不合居多。原因:(1)患者红细胞被自身抗体致敏,其中直抗阳性是次侧不合的主要原因。主要见于溶贫、再障、淋巴细胞性白血病、MM、MDS、PNH。多次反复输血,尤其是输注大量血浆的患者。(2)药物免疫性抗体引起。(3)新生儿红细胞上抗原较弱。在967例交叉配血中·MGT法共有6例配血不合.其中1例主侧配血不合为白血病患者,其血型为A型RhD阳性.我们用多袋“A”型血与其配血,结果有的配合,有的主次侧均不配合.经不规则抗体筛选和鉴定.检出患者血清中有E抗体,IAT试验阳性.然后有针对性的筛选相应抗原阴性献血者,并采用盐水法、抗人球蛋白法、MPT法等进行配血,为患者挑选了配血相合的血液输注.未发生不良反应。5例次侧不合的患者均有输血史.(1例自身免疫性溶贫、4例肿瘤患者)但这些凝集均在1+~2+。患者输注了配血相合的红细胞悬液后未引起输血反应。AIHA患者病程较长,反复输血可能产生同种抗体,而血清中存在的自身抗体可以掩盖同种抗体,导致配血困难。对于这类情况选取凝集最弱的供者予以输注,输血效果较好。肿瘤患者其本身易产生高效价的冷凝集素.且红细胞上T、Tn类抗原易暴露,纤维蛋白升高,反复多次输注大量异体血液制品可产生红细胞及白细胞抗体,这些抗体易吸附在患者红细胞上,故主要出现次侧凝集。这类患者应尽量减少输血,必须输血时,可输少量同型的浓缩红细胞或洗涤红细胞,且应缓慢输注。密切观察。
 
综上所述,MGT法是一种较好的血型血清学实验方法。使用MGT法与MPT法联合配血,或多种方法联合配血,有助于最大限度减少输血反应的发生,保证临床输血安全。
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