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SOP标准文件之ABO血型鉴定(生理盐水法)(2)

时间:2010-11-27 22:22来源:幸福检验 xf366.com 点击:

9. 临床意义:输血、器官移植与亲子鉴定

10. 操作性能:快速简便、特异性强、灵敏度高、重复性好。

11 超出范围结果处理

11.1 红细胞自凝:冷凝集系增高是最为常见原因。应用37℃-40℃的生理盐水洗涤红细胞可去除红细胞表面附着的导致红细胞凝集的冷集素。

11.2 正反定型结果不一致原因

11.2.1 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高,可

A亚型误定为O型,AB型误定为B型。

11.2.2 红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例则不适当,使反应不明显,误判为阴性反应。

11.2.3 受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤)以及B类或cisAB等。

11.2.4 受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症),或实验时温度过高,常引起红细胞呈缗钱状排列。

11.2.5 受检者血清中缺乏应有的抗—A和抗—B抗体,如丙种球蛋白缺乏症。

11.2.6 各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。

11.2.7 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

11.2.8 血清中有意外抗体,如自身抗—I,常引起干扰。

11.2.9 老年人血清中抗体水平大幅度下降。

11.3 正反定型结果不一致的解决方法:

11.3.1 另从受检者采取1份新鲜血液标本,这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。

11.3.2 将红细胞洗涤数次,配成2%盐水细胞悬液,用抗—A、抗—B、

—AI,抗—A+B及抗—H做试验可以得到其它有用的信息。

11.3.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验,如结果呈阳性,表示红细

胞已被抗体致敏。

11.3.4 用A1、A2、B、O红细胞从自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗—I,用O型(或ABO相合的)脐血红细胞检查。

11.3.5 如果试验结果未见凝集,应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min,用显微镜检查核实。

11.3.6 如疑为A抗原或B抗原减弱,则可将受检红细胞与抗A或抗—B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB分泌型的人有用。

11.3.7 如试验结果红细胞呈缗钱状排列,加等渗盐水1滴,混合。往往可使缗钱现象消失。应注意不应先加盐水1滴于受检者血清中而后和红细胞作试验,以免使血清中抗体被稀释。

11.3.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时,可用下列方法进行鉴别:

11.3.8.1 观察细胞与抗—A及抗B的凝集强度,与抗A的反应要比抗—B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。

11.3.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验,血清中的抗—B不凝集自身红细胞上的类B抗原。

11.3.8.3 检查唾液中是否有A、B物质,如果是分泌型,可检出A物质而无B物质。

11.3.8.4 核对患者的诊断,类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴件杆菌感染有关。

12. 方法局限性

12.1 分型血清质量性能符合要求,用毕后,应放置冰箱保存,以免细菌污染。

12.2 试管、滴管和玻片必须清洁干燥,防止溶血。

12.3 操作方法应按规定,一般应先加血清,然后再加红细胞悬液,

以便容易核实是否漏加血清。

12.4 按理IgM抗—A和抗—B与相应红细胞的反应温度以4℃为最

强,但为了防止冷凝集现象干扰,一般仍在室温(20℃-24℃)内进行试验,37℃可使反应减弱。

12.5 离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性

或假阴性结果。

12.6 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。

12.7 判断结果后应仔细核对、记录,避免笔误。

12.8 试剂一旦发现浑浊不得使用。

12.9 制红细胞悬液时防止自凝现象。

13. 参考文献

中国人民共和国卫生部医政司编. 全国临床检验操作规程(第二版). 1997,89-92

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