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100×Denhardt试剂（Denhardt'sregent） 依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端连接） 将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20℃。 100mmol/LdNTP溶液（dNTPsolutions） 可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液，-80℃可贮存至少6个月。 10mmol/LdNTP混合液 20％PEG8000/2.5MNaCl 加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。 20×SSC 溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴10NNaOH溶液调pH为7.0，用水补足体积至1L。 DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 加100ulDEPC于100ml水中，使DEPC的体积分数为0.1％。在37℃温浴至少12h，然后在15psi 条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。 甲酰胺（deionizedformamide） 直接购买或加DowexXG8混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80℃贮存（防止氧化）。 磷酸缓冲液（phosphatebuffer） 按照下表所给定的体积，混合1mol/L的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1mol/L 的磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。 TE（用于悬浮和贮存DNA） Tris缓冲液（Tris-HClbuffer） 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。 二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液 染料 1％溴酚蓝（bromophenolblue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1％二甲苯青FF（xylenecyanoleFF） 溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。 10mg/ml的溴化乙锭（ethidiumbromide） 小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。 凝胶上样液（gelloadingsolutions） 6×碱性凝胶上样液（室温贮存） 6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 6×甘油凝胶上样液（4℃贮存） 6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） 三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： |