管理规定 科室管理质量控制 服务沟通
返回首页

血酶学测定的标本处理因素

时间:2010-03-24 11:28来源:收集整理 点击:

   血酶学测定的标本处理因素不同,经常对结果产生较大的误差而影响临床诊断。本文以超氧化物歧化酶(sod)为例,探讨sod测定的一些影响因素,报告如下。


  1  材料和方法


  1.1  材料  cu/zn、sod ria kit:由第二军医大学提供。


  1.2  方法  10例正常人和10例肝病患者均空腹抽血,1h内分离血清。溶血血清为抽血后迅速于-20℃冻融离心而成。0.5h、1h和3h分离的血清在15~25℃条件下进行。血浆均按常规抗凝剂浓度抗凝。


  2  结果


  sod ria测定的影响因素见表1。分为(1)血清与溶血血清:表中cv为同1份血清作3管的平均变异(批内);(2)血清与血浆:表中cv为同1份血清或血浆4种情况的平均变异(批内);(3)血清分离时间:表中cv为同1份血清3种情况的平均变异(批内);(4)血清贮存温度与时间:表中cv为同1份血清3周贮存的平均变异(批间)。


  表1  sod ria测定的影响因素 略


  3  讨论


  影响sod  ria的测定结果除试剂盒因素外,对标本处理不当更为重要。实验结果显示同份血清的批内变异为5.8%,原血清和-20℃贮存血清的批间变异为10.3%,说明试剂和操作过程是基本可靠的。溶血标本的sod活力3~15倍于无溶血标本,病理情况下变化更大,其升高幅度因溶血程度而异,因此血清sod活力测定要绝对避免溶血。抗凝血对sod测定均有不同程度的影响,可能血浆中的抗凝剂能直接或间接地抑制酶的活性,因此sod测定最好用血清。室温条件下不能保持sod活力,20℃第2周后的酶活力将大部分失活,因此抽血分离血清后要及时将标本存放于冰箱中。标本于4℃及-20℃条件下贮存两周均可保持sod活力,但4℃3周比-20℃3周的酶活力明显下降,其cv值亦增大,因此2周内测定,标本于4℃贮存即可,如遇特殊情况需要保存2~3周,则要-20℃贮存,以免失活。同时贮存血清或其他标本(4℃或室温)如果长菌,则不宜测定sod,因需氧菌生长时不但能产生o-2,而且可产生sod,其测定结果不能真正代表体内sod活力。至于血清分离时间,笔者认为以1h内为好,既要保持sod活力,又要避免半小时内血样高速离心或3h后暴露过久以及温度过高所造成的溶血或失活而影响测定结果。本实验除t(或t’)检验有差异的7组对测定结果的影响最明显外,其余组虽差异无显著性(p均>0.05),但其cv值多数>15%(批内或批间),不符合ria二抗夹心沉淀法的要求。其影响因素可概括为,溶血(p<0.01)>血清贮存温度和时间不当(p<0.05)>血浆>血清分离时间。

 

------分隔线----------------------------
赞助商链接
推荐内容
赞助商链接
赞助商链接