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大家总会提出为什么测定会出现负值的问题，我从仪器角度解释一下测定数据是如何计算出来的，如果大家能熟悉这一计算过程，对于出 现负值的原因查找会有帮助。咱就以2点终点法为例子吧
首先是吸光度度的计算，下图给出的是一个尿酸标本测定曲线，其中黑色圈内的测光点是我们计算用的，分别是15点与16点的吸光度 均值A1、33点与34点的吸光度均值A2。其公式为
A=A2 - K * A1 其中K为液量修正系数，其计算方法为
K= （S + R1）/ （S + R1 + R2） S是标本量、R1、R2分别是试剂一、二的量
这时我们得到吸光度A值后，开始浓度的计算 浓度C =[K * （ A — B） + C1]* IFA + IFB 其中B是S1ABS吸光度，也就是空白或第一标准液的吸光度， C1是空白或是第一标准液浓度， K是K系数，也就是下图中所做标准曲线的斜率（图中已标出） IFA、IFB都是仪器常数，在一般情况下IFA=1，IFB=0，C1=0，所以该公式可以简化成C = K *（A — B） K系数的计算是通过仪器测定S1（标准液1）、S2（标准液2）的A值以及给定的浓度来计算的。 通过以上计算我们可以知道结果为负值有两个环节可能出现，一是A2—K*A1时，第二是A — B（空白吸光度）时，前一种情况说明试剂质量完全失效，应更换，但是日常出现这样情况非常少见，而第二种情况是最多见的，所以为 什么总是推荐大家每天做空白校正，就是这个原因。每天的试剂都在变化，试剂空白吸光度也在变化，这样既可以预防试剂过期，也可以 减少被测物含量很低的标本出现负值的几率。 |